[发明专利]植物中类胡萝卜素酯类化合物的液质联用分析方法

说明书

本发明涉及一种植物中类胡萝卜素酯类化合物的液质联用分析方法，包括如下步骤：制备待测植物样品溶液，在特定的色谱条件和质谱条件下采用LC‑MS/MS检测分析，根据类胡萝卜素酯类化合物的定性Q1/Q3离子对，确定待测植物中是否含有类胡萝卜素酯类化合物。该液质联用分析方法可适用于不同植物样本中类胡萝卜素酯类物质的快速分析。

技术领域

本发明涉及检测分析技术领域，尤其涉及一种植物中类胡萝卜素酯类化合物的液质联用分析方法。

背景技术

类胡萝卜素(carotenoids)是一类重要的天然色素的总称，分为胡萝卜素和叶黄素。类胡萝卜素酯类化合物是植物中叶黄素类化合物与脂肪酸通过酯化反应形成的一类物质。在植物中，类胡萝卜素一部分以游离态存在，一部分以类胡萝卜素酯类化合物的形式存在。

目前，商业化的类胡萝卜素酯类物质标准品稀少，因此，通常无法直接通过绝对定量的方式对植物中的类胡萝卜素酯类物质进行一一定量检测分析。

发明内容

基于此，有必要提供一种类胡萝卜素酯类化合物的液质联用分析方法，能够适用于不同植物样本中类胡萝卜素酯类物质的快速定性及半定量分析。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

本发明提供一种植物中类胡萝卜素酯类化合物的液质联用分析方法，包括如下步骤：

确定采用LC-MS/MS检测分析的参数条件，色谱条件：采用反向色谱柱，柱温25℃～30℃，流动相A为含0.08％～0.12％甲酸、0.008％～0.012％BHT、甲醇20％～30％的乙腈溶液，流动相B为含0.008％～0.012％BHT的甲基叔丁基醚，采用梯度洗脱方式；质谱条件：采用正离子模式和MRM扫描模式；

制备待测植物样品溶液，按照所述色谱条件和所述质谱条件上机测试；

根据类胡萝卜素酯类化合物的至少两对定性Q1/Q3离子对信息确定待测植物中是否含有类胡萝卜素酯类化合物。

若待测植物中含有类胡萝卜素酯类化合物，则采用类胡萝卜素或其酯类化合物标准品，建立标准曲线法测定所述待测植物中类胡萝卜素酯类化合物的含量。

优选地，所述反向色谱柱为YMC C30柱，所述柱温为28℃，所述流动相A为含0.08％～0.12％甲酸、0.008％～0.012％BHT、甲醇23％～27％的乙腈溶液，所述梯度洗脱程序为：

0min，流动相A与流动相B的体积比为100:0；

3min，流动相A与流动相B的体积比为100:0；

5min，流动相A与流动相B的体积比为30:70；

8min，流动相A与流动相B的体积比为5:95；

9min，流动相A与流动相B的体积比5:95；

9.01min，流动相A与流动相B的体积比为100:0；

10min，流动相A与流动相B的体积比为100:0。

优选地，所述质谱条件为：APCI+离子源，离子源温度为345℃～355℃，气帘气压力为25psi，辅助加热气Gas1压力为55psi，辅助加热气Gas2压力为60psi，碰撞气压力为12psi，MRM监测窗口为120s。

在其中一些实施例中，所述定性Q1/Q3离子对的建立方法包括如下步骤：

根据已知分子结构的胡萝卜素酯类化合物的碳骨架结构以及其端羟基与脂肪酸的结合形式，推导理论上可形成的类胡萝卜素酯化合物的分子结构和分子量；