[发明专利]一种石蜡切片透蜡的方法

说明书

本发明公开了一种石蜡切片透蜡的方法。本发明利用恒温金属浴进行石蜡切片透蜡步骤，控温精准，升温速度快，稳定性高，能减少蜡块中出现气泡、裂隙等情况，有效提高透蜡成功率并简化操作步骤，制作的切片组织无明显切空切坏的地方，组织完整且细胞核清晰可见，效果好；同时可定制的金属模块能满足不同实验室对不同形状样品的制样需求，适应范围广；金属浴仪器操作简单，上手快，体积小巧可移动性强，安全可靠，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于石蜡切片领域，具体涉及一种石蜡切片透蜡的方法。

背景技术

石蜡切片制片技术是目前最广泛应用的方法之一，是组织学、发育生物学研究的主要实验方法，同时也是病理学中观察病理变化的重要手段，广泛地应用于临床病理诊断、教学和科研工作中。动、植物标本的形态学观察、免疫组化、原位杂交及原位PCR等技术手段，都离不开标本组织的处理和石蜡切片的制作，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。常规石蜡切片的制作过程包括石蜡组织块制作、切片制作和染色，具体的制作过程是：取材→固定→冲洗→脱水→透明→透蜡→包埋→切片→贴片→烤片→染色→封固。其中的每一个环节都是相互关联、一环套一环的，任何一个环节不按规范去操作，都会影响最终制片的成败。其中透蜡的目的是使石蜡逐渐渗透进入组织间隙，取代上一步透明时所用的透明剂，达到包埋的支持作用。透蜡操作通常在恒温箱中进行，恒温箱体积大，占地面积多，在操作过程中一旦打开箱门温度便迅速降低，很有可能导致石蜡凝固，难以均匀地渗透到组织内部，造成组织与石蜡脱离，蜡块中出现气泡、裂隙等情况，最终导致制片的失败。此外，透蜡温度要恒定，不可忽高忽低，恒温箱较难保证。

恒温金属浴是一种采用微电脑控制和半导体制冷技术制造的一款恒温产品，仪器的金属模块可以根据实验需求经行更换，可定制性高，能满足不同试管的加热需求；金属模块采用铝合金，升温速度快、加热均匀、控温准确、稳定性高。仪器操作面板能数字显示温度，随意设定、自动恒温、使用方便；占用的空间范围小，功耗低，带来更多的自由和方便。目前已广泛应用于样品的保存和反应、核酸和蛋白质的变性处理、PCR反应、电泳的预变性和血清凝固等，应用的行业遍及医药、化工、食品安全、质检、环境等。

发明内容

本发明的目的是为了解决传统石蜡切片透蜡步骤使用恒温箱带来的温度浮动大，操作繁琐，耗能高以及制片效率低等问题，因此为了提高石蜡切片制片成功率，简化操作步骤，利用一种实验室常见的恒温仪器(即恒温金属浴)来解决恒温箱透蜡带来的诸多不便显得很有必要和实际应用意义；因此提供一种石蜡切片透蜡的方法。

本发明利用恒温金属浴来解决恒温箱透蜡带来的诸多不便，可控性强，控温精度并且更为稳定，能极大提高透蜡成功率，带来更好的体验。

本发明的石蜡切片透蜡的方法，其特征在于，切片透蜡步骤中用恒温金属浴保温。

优选，所述的切片透蜡步骤如下：

a.将待透蜡的材料置于离心管中，加入1/2体积的碎石蜡和1/2体积的二甲苯，于恒温金属浴中40℃-42℃保温3h；

b.取出材料于新的离心管中加入3/4体积的碎石蜡和1/4体积的二甲苯，于恒温金属浴中48-50℃保温3h；

c.取出材料于新的离心管中加入石蜡于恒温金属浴中56℃-58℃保温1h；然后重复该步骤两次。

本发明方法步骤c中，每隔1小时换一次新鲜的石蜡，确保透蜡充分。并且设定的温度(56-58℃)是根据所用是石蜡的熔点来设定的，一般略大于或等于石蜡的熔点。

所述的恒温金属浴是杭州佑宁仪器有限公司生产的干式恒温仪，型号：GA150-2。

本发明方法具有以下优点：