[发明专利]一种CircRNA作为肝癌肿瘤标志物的评价方法

说明书

本发明属于生物技术与基因工程技术领域，具体涉及一种CircRNA作为肝癌肿瘤标志物的评价方法。本发明提供的评价方法，以CD90posi细胞亚群的CircRNA作为肿瘤标志物，检测肝癌患者中肿瘤细胞CD90posi的数量，进而评价肝癌的严重程度。本发明提供的评价方法，操作过程简单，可以有效检测CD90posi细胞的富集程度，为肿瘤检测提供了一种新技术，也为肿瘤治疗提供了一种新的思路。

技术领域

本发明属于生物技术与基因工程技术领域，具体涉及一种CircRNA作为肝癌肿瘤标志物的评价方法。

背景技术

原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发病率高、死亡率高，病死率位居国内肿瘤第二位，严重威胁人民群众的生命健康。肝癌起病隐匿，临床表现缺乏特别性，就医时往往处于肝癌中晚期，肝癌早期患者难以发现，严重影响肝癌的治疗效果。最新临床统计显示，中国每年新发原发性肝癌患者80万左右，占全球的55％；每年因原发性肝癌死亡数占全球的45％～50％，而广东省肝癌死亡率比全国平均水平高50％。

目前肝癌的临床检测手段主要通过检测患者血清甲胎蛋白(AFP)并结合影像学检查进行确诊，可分为以下几类：B超检查受肠气及周围脏器的影响，分辨率低，B超引导下进行肝脏病灶穿刺活检存在一定假阴性率；同时肝脏穿刺存在创面出血、针道转移等严重并发症。CT或MR仅能分辨直径1.0cm以上的病灶，且有一定的假阳性率与假阴性率。DSA技术虽可提高肝癌检测的准确率，但为侵入性检查，多用于肝癌治疗。

由于血清AFP显著升高一般出现在肿瘤进展期，且阳性率仅为60-70％，在准确率、检测效率、诊断扰动后对病人治疗风险性和诊断时间的滞后等方面都有明显的局限性，开发新的检测手段有其重要性与迫切性。

近年国内外研究发现了一种新型无创检测手段----液体活检。肝癌的液体活检研究主要以循环肿瘤DNA(ctDNA)甲基化检测为代表，其本质是通过提高痕量检测的精度增加肿瘤检测的准确率。申请者认为，寻找并验证液体活检新的肝癌分子标志物，如新发现的CircRNA，是液体活检一个新的发展方向。

肿瘤的发生是多因素协同作用的结果。以表观遗传为例，基因5’端启动子区DNA甲基化能影响启动子活性，而miRNA则从3’UTR区发挥调控功能，二者既能协同作用，也能相互制约，研究发现，约10％的miRNA表达受到DNA甲基化的影响；而circRNA可作为miRNA海绵或缓冲剂，通过吸附或释放miRNA来影响靶基因表达。而如何利用RNA检测靶标基因，现有技术并未给出。

随着人们生活水平的不断提高，肝癌患病几率不断扩大，如何更好的检测、治疗肝癌逐渐成为一个全民关注的问题。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术普遍存在的缺陷，提供一种用CircRNA作为肝癌肿瘤标志物的评价方法。本发明以CircRNA为肿瘤标志物，通过检测CD90posi细胞的数量，评价肝癌的患病情况，操作方法简单，成本低，有利于实际应用，为肿瘤检测提供了一种新技术，也为肿瘤治疗提供了一种新的思路。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种CircRNA作为肝癌肿瘤标志物的评价方法，所述CircRNA的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。

CTTTACAGATACTGTGATACGGATCAGAAACCGACACAATGATGACATTCCCACAATGGCCCAGGGTGTGATTGAATACAAGGAGAGCTTTGGGGTGGATCCTGTCACCAGCCAGAATGTTCAGTACTTTTTGGATCGATTCTACATGAGTCGCATTTCAATTAGAATGTTACTCAATCAGCACTCTTTATTGTTTGGTGGAAAAGGCAAAGGAAGTCCATCTCATCGAAAACACATTGGAAGCATAAATCCAAACTGCAATGTACTTGAAGTTATTAAAG(SEQ ID NO.1)；