[发明专利]一种尿液保存液及其用途

说明书

本发明提供的一种尿液保存液，包括：pH缓冲剂6‑10mmol/L、DNA酶抑制剂0.2‑0.4mol/L、防腐剂0.1‑0.3mol/L、细胞固定剂质量分数5％‑15％和甲醛淬灭剂0.3‑1.0mol/L；上述尿液保存液中，避免了各组分之间相互干扰影响各组分的功能，在4℃‑40℃之间仍旧具有各自相应的保护作用，且对尿液中核酸没有直接影响，因此，保存液可在4℃‑40℃下仍然能维持尿液不变质，保证cfDNA的相对含量。

技术领域

本发明涉及生物样品保存领域，具体涉及一种尿液保存液及其用途。

背景技术

尿液是人体排出的一种成分复杂的代谢废弃物，主要通过人体泌尿系统(肾单位→肾盂→输尿管→膀胱→尿道)产生。尿液中96％以上为水分，同时也包括很多病理性代谢产物如游离核酸、蛋白类和糖类物质等。游离DNA(Cell-Free Circulating DNA，cfDNA)是指来自细胞凋亡或坏死，游离于细胞外的DNA片段，广泛存在于人类的血清、血浆、脑脊液、尿液或唾液当中。目前，cfDNA已作为新的生物标志物用于临床孕妇产前诊断、肿瘤检测、器官移植术后排斥和感染检测等领域。其中，尿液中cfDNA主要来自于泌尿系统中器官上皮细胞脱落及少量的白细胞降解和感染的病原菌片段，当人体的泌尿系统发生病变，尿液中的cfDNA含量也随之发生改变。最近研究发现，尿液cfDNA包含有微生物组中细菌和病毒、药物敏感性、细菌生长动态、肾移植损伤和对感染的宿主响应的丰富的信息，并被认为是监测尿道感染的通用分析物。

然而，相对于外周血，尿液中成分更加复杂，特别是核酸酶的含量更高，这就造成尿液中的cfDNA更加容易被降解，浓度降低，无法真实反映机体的病理变化。此外，尿液中脱落的完整的上皮细胞或白细胞在复杂环境中不稳定，破裂释放基因组DNA进入尿液中，这也改变尿液中真实cfDNA的浓度，影响目标位点的比例，特别是对于低频变异位点，增加了背景噪音，并易造成假阴性。而对于已报道的现有技术中，其成分复杂、成本较高，且保存效果随时间延长下降严重，需要进一步改进。因此，为了保证尿液cfDNA检测结果的准确性，一种专门适用于尿液cfDNA保存液及保存管是需要的。如中国专利文献公开的CN107603970A公开的一种防止尿液中游离DNA降解的尿液保存剂及尿液保存管，能够在4℃条件下保存尿液最长达7天，期间游离DNA不会发生明显降解，且尿液中脱落细胞的gDNA不会显著释放尿液中，影响尿液中游离DNA的含量。然而上述文献中公开的尿液保存剂只能在低温条件下如4℃或更低的温度下使用，使得运输成本高。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中的尿液保存剂只能在低温条件下使用，使得运输成本高缺陷，从而提供一种使用温度范围扩大的尿液保存液及其用途。

为此，本发明提供了如下的技术方案：

第一方面，本发明提供了一种尿液保存液，包括：pH缓冲剂6-10mmol/L、DNA酶抑制剂0.2-0.4mol/L、防腐剂0.1-0.3mol/L、细胞固定剂质量分数5％-15％和甲醛淬灭剂0.3-1.0mol/L。

优选的，所述尿液保存液包括：pH缓冲剂6-8mmol/L，DNA酶抑制剂0.2-0.3mol/L，防腐剂0.1-0.2mol/L，细胞固定剂质量分数5％-10％，和甲醛淬灭剂0.3-0.6mol/L。

更优选的，所述的尿液保存液包括：pH缓冲剂7.5-8mmol/L，DNA酶抑制剂0.2mol/L，防腐剂0.1mol/L、细胞固定剂质量分数5％，和甲醛淬灭剂0.3mol/L。

进一步的，所述pH缓冲剂包括Tris-HCl、磷酸盐(PO₄^3-)、醋酸盐(CH₃COO^-)、碳酸氢盐(HCO₃^-)和硼酸盐(BO₃^-)中的至少一种；优选的，pH缓冲剂为Tris-HCl，pH为7.0-8.0。