[发明专利]一种前列腺癌的外周血TCR标志物及其检测试剂盒和应用

说明书

本发明公开了一种前列腺癌的外周血TCR标志物及其检测试剂盒和应用。该标志物包括序列为SEQ ID NO.1～100所示的蛋白中的至少一种。本发明基于高通量测序方法，只需要采取少量外周血，提取RNA，通过对样本的处理建立免疫图谱文库，再经过高通量测序和TCR数据分析，首先确定前列腺癌外周血中特征性TCR序列，然后将待测样本测试结果与该特征性TCR序列比对，从而确定是否患有前列腺癌。本发明能够同时比较巨大数量的前列腺癌特异性TCR序列，相比单独检测一种或几种标记物，具有更高的特异性和准确性，提高了诊断效率。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种前列腺癌的外周血TCR标志物及其检测试剂盒和应用。

背景技术

前列腺癌是指发生在前列腺的上皮性恶性肿瘤。根据2004年WHO《泌尿系统及男性生殖器官肿瘤病 理学和遗传学》，前列腺癌病理类型上包括腺癌(腺泡腺癌)、导管腺癌、尿路上皮癌、鳞状细胞癌、腺鳞 癌，其中前列腺腺癌占95％以上，因此，通常我们所说的前列腺癌就是指前列腺腺癌。

前列腺癌发生的主要危险因素包括遗传以及家庭因素等，与生活习惯也有关系。有报道称前列腺癌的 发病与性活动、饮食习惯有关。性活动较多者患前列腺癌的风险增加。高脂肪饮食与发病也有一定关系。 此外，前列腺癌的发病与种族、地区可能有关。前列腺癌发病年龄在55岁前处于较低水平，55岁后逐渐 升高，发病率随着年龄的增长而增长，高峰年龄是70～80岁。家族遗传型前列腺癌患者发病年龄稍早， 年龄≤55岁的患者占43％。

从全球范围来看，发达国家的前列腺癌发病率高于发展中国家，目前美英法德日占据总发患者数的 70％。随着发展中国家的经济高速增长，发展中国家近年来发病率也在快速提升。2012年我国肿瘤登记地 区前列腺癌发病率为9.92/10万，列男性恶性肿瘤发病率的第6位。我国2016年前列腺癌新发患者12万 人，预计2030年，我国前列腺癌新发患者数量将达到23.7万人，新发患者数量的年复合增长率为5％。

早期前列腺癌可以进行有效诊疗和控制，未转移前列腺癌生存时间较长，转移后不可治愈。由于早期 筛查渗透率较低，因此发展中国家前列腺癌死亡率高于发达国家。在美国，患病5年的患者生存率在98％ 以上，而同样的患者在中国生存率仅为50％。以此，寻求更简便更可靠的早期筛查诊断手段，对前列腺癌 的防治具有重大现实意义。

前列腺癌早期常无症状，随着肿瘤的发展，前列腺癌引起的症状可概括为两大类：

1、压迫症状：逐渐增大的前列腺腺体压迫尿道可引起进行性排尿困难，表现为尿线细、射程短、尿 流缓慢、尿流中断、尿后滴沥、排尿不尽、排尿费力，此外，还有尿频、尿急、夜尿增多、甚至尿失禁。 肿瘤压迫直肠可引起大便困难或肠梗阻，也可压迫输精管引起射精缺乏，压迫神经引起会阴部疼痛，并可 向坐骨神经放射。

2、转移症状：前列腺癌可侵及膀胱、精囊、血管神经束，引起血尿、血精、阳痿。盆腔淋巴结转移 可引起双下肢水肿。前列腺癌常易发生骨转移，引起骨痛或病理性骨折、截瘫。前列腺癌也可侵及骨髓引 起贫血或全血象减少。

目前临床诊断前列腺癌的主要方法有：

1、直肠指检：在前列腺癌的早期诊断中极为重要,其准确率可达50％—70％。很多学者主张在前列腺 癌高发地区,对中年以上男性定期进行直肠指检,将使很多病人得到早期诊断及根治的机会。

2、穿刺活检：经会阴、直肠穿刺,取活体组织检查,其诊断的正确率可达70％—80％。

3、影像学检验：经直肠前列腺超声和盆腔MRI检查。

4、前列腺液检验：其阳性率可达90％以上。绝大多数病例可由此得到确诊。

5、血清PSA检验：