[发明专利]卵巢癌标志物CA125的定量检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种卵巢癌标志物CA125的定量检测试剂盒，所述试剂盒包括以下组分：CA125捕获抗体包被的微孔板，生物素标记的检测抗体，标准品，稀释液，洗涤液，显色液，终止液。其中，通过采用特定修饰的纳米硅基材料来负载检测抗体，对检测低浓度样品时的性能有较大提升，既实现了检测抗体体系的稳定性，也可以获得更高的灵敏度和准确度。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其是涉及一种卵巢癌标志物CA125的定量检测试剂盒。

背景技术

卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤，也是妇科肿瘤死亡率最高的肿瘤类型，死亡率约为25%，即每四个卵巢癌患者中就有一人死亡。据估计，中国每年每10万人中就有五人被诊断为新发卵巢癌。卵巢癌通常表现为附件肿块，因临床症状不明显，容易造成漏诊与误诊。因此，超过70-75%的卵巢癌患者确诊时已处于癌症晚期，并已扩散到其他器官，错过了最佳治疗时机。在女性的一生中，每五位女性就会有一位出现盆腔肿块，需要接受检查来排除恶性肿瘤的可能性。近20年来，卵巢癌的5年生存率一直徘徊在较低水平，5年内的复发率高达80%，且复发时间主要集中在治疗期的3年内。尽管卵巢癌的预后较差，但如果卵巢癌能被尽早诊断，癌细胞仅在于卵巢内，患者的存活率可以提高到75-95%，极有可能被治愈。因此，卵巢癌的早期诊断和治疗监测尤为重要。

目前，卵巢癌的诊断主要依据两种检测手段。一种是经阴道超声检查（TUV），这种成像方法可用于检查女性的生殖器官，包括子宫、卵巢、宫颈及阴道。尽管其应用较为普遍，但是这种方法并不能准确检测出该肿块是良性还是恶性。此外，该方法还需要经验丰富的临床技师对检测结果进行解读。

另一种常规检测方法是检测生物标志物CA125，这种方法被视为卵巢癌诊断的“金标准”。CA125是1981年由Bast等从上皮性卵巢癌抗原检测出可被单克隆抗体OC125结合的一种糖蛋白，来源于胚胎发育期体腔上皮，在正常卵巢组织中不存在，最常见于上皮性卵巢肿瘤（浆液性肿瘤）患者的血清中，其在检测卵巢上皮肿瘤患者血清中的阳性率高达82％-94％，在临床实践中研究发现患者血清中CA125的值与临床病理分期有关，随着临床分期的增高，CA125的含量也随之增高。可见卵巢癌的发生、发展和转归与CA125在患者血清中的表达有相关性。

酶免疫分析(Enzyme Immunoassay)是一种非放射性标记免疫分析技术，以酶标记抗原或抗体作为示踪物，由高活性的酶催化相应的底物显色，达到定量分析的目的。该方法因操作简便、不需昂贵设备、不污染环境、加之酶标记物稳定性好、有效期长及应用范围广等优势，受到科研工作者广泛的青睐。酶联免疫吸附法(ELIS A)是应用最为广泛的一种酶免疫分析方法，该方法以酶（辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（ALP）)标记抗原或抗体，将免疫学反应的特异性与酶催化底物的高效性和专一性结合起来的一种分析方法。由于酶的催化效率很高，间接放大了免疫反应的结果，使该方法具有较高的灵敏度。此外，ELISA具有技术条件要求低、携带方便、操作简便和经济、有效期长、灵敏度高、特异性强、可实现大批量检测、常以试剂盒的形式出现且易商品化等优点，使之成为应用最为广泛和发展最为成熟的生物分析技术之一。酶联免疫吸附法在在CA125的测定上具有一定优势。

尽管酶免疫分析在分析检测领域获得了广泛的推崇，但该方法也存在一定的问题，如ELISA易受外界因素干扰，造成假阳性；其次，ELISA方法灵敏度偏低，无法实现对低浓度目标分析物的检测。因此，如何提高酶联免疫吸附法在CA125的测定上的灵敏度和准确性、减少检测周期是亟需解决的问题。

发明内容

针对上述现有技术的缺陷，本发明意在提供一种CA125定量检测试剂盒，其不仅检测速度快，血液标本用量少，避免了非特异性结合，检测精密度高，稳定性好，为临床医师提供更准确的检测结果，极大改善卵巢癌的诊断与管理。本发明的技术方案如下：

一种卵巢癌标志物CA125的定量检测试剂盒，所述试剂盒包括以下组分：

（1）已经包被了CA125的捕获抗体的酶标板；