[发明专利]一种β-葡萄糖苷酶、其编码基因及其表达和应用在审

专利信息
申请号: 202010653370.0 申请日: 2020-07-08
公开(公告)号: CN111690630A 公开(公告)日: 2020-09-22
发明(设计)人: 解静聪;蒋剑春;张宁;杨静;徐浩;赵剑 申请(专利权)人: 中国林业科学研究院林产化学工业研究所
主分类号: C12N9/42 分类号: C12N9/42;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P33/20;C12R1/19
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 唐循文
地址: 210042 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 葡萄 糖苷酶 编码 基因 及其 表达 应用
【权利要求书】:

1.一种β-葡萄糖苷酶,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种β-葡萄糖苷酶基因,其特征在于,编码权利要求1所述的β-葡萄糖苷酶。

3.如权利要求2所述的β-葡萄糖苷酶基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.一种携带如权利要求2或3所述的基因的重组质粒。

5.根据权利要求4所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒的制作方法如下:将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-葡萄糖苷酶的编码基因和pET-20b质粒分别用Nde I和Xho I进行双酶切,连接得到含有所述β-葡萄糖苷酶的核苷酸序列的重组质粒。

6.一种表达如权利要求1所述的β-葡萄糖苷酶的方法,其特征在于,步骤如下:将权利要求5所述的重组质粒转化表达宿主菌BL21(DE3),不加IPTG于37℃下诱导表达,离心收集菌体,破碎菌体后经Ni2+亲和层析柱纯化即得。

7.权利要求1所述的β-葡萄糖苷酶在转化黄酮糖苷类化合物和皂苷用于制备稀有苷元及单糖苷化合物中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述β-葡萄糖苷酶的转化条件为pH 4-8,温度30-95℃。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述β-葡萄糖苷酶的转化条件为pH 6.5,温度95℃。

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