[发明专利]基于脐带间充质干细胞用于毛发再生的冻干粉、制备方法、生发营养液及毛发再生方法

说明书

本发明公开了一种基于脐带间充质干细胞用于毛发再生的冻干粉、制备方法、生发营养液及毛发再生方法。该冻干粉的制备方法包括：采用脐带间充质干细胞制备冻干粉原液；将冻干保护剂与冻干粉原液混匀，得到中间液；将所述中间液在预设冻干条件下进行冻干，以得到所述冻干粉。所制得的冻干粉和生发营养液对于促进人体毛囊修复以及促进毛发再生中的至少一者具有显著的效果，有助于缓解脱发的趋势和/或改善毛发状态。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种基于脐带间充质干细胞用于毛发再生的冻干粉、冻干粉的制备方法、生发营养液及毛发再生方法。

背景技术

近年来，随着社会竞争日益激烈以及环境不断恶化，脱发人群不断上升，且更加年轻化。快节奏的工作、高压力的生活、过重的学习强度，都会加重脱发现状。面对如此庞大的脱发人群，研究一种能够促进毛发再生的产品是本领域技术人员亟待解决的技术问题之一。

发明内容

本发明提供了一种基于脐带间充质干细胞用于毛发再生的冻干粉、冻干粉的制备方法、生发营养液及毛发再生方法，旨在制备并提供一种能够促进毛发再生的冻干粉。

本发明的第一方面，本发明提供了一种基于脐带间充质干细胞用于毛发再生的冻干粉的制备方法，包括：采用脐带间充质干细胞制备冻干粉原液；将冻干保护剂与冻干粉原液混匀，得到中间液；将所述中间液在预设冻干条件下进行冻干，以得到所述冻干粉。

在本发明的制备方法中，所述采用脐带间充质干细胞制备冻干粉原液，包括：对脐带间充质干细胞进行原代提取和传代培养，得到传代培养产物；对所述传代培养产物进行预处理，得到第一液体；将所述第一液体和第二液体混匀，得到所述冻干粉原液。

在本发明的制备方法中，所述对脐带间充质干细胞进行原代提取和传代培养，得到传代培养产物，包括：将脐带进行脐带预处理，得到脐带组织；在所述脐带组织中加入0.1％的Ⅱ型胶原酶在预设消化条件下进行消化，得到第一过渡体；将所述第一过渡体进行过滤并在过滤后的液体中加入等量的第一培养基进行离心，吸去基础培养基，得到第二过渡体；在所述第二过渡体中加入第二培养基重悬，并在第一预设培养条件下进行贴壁培养得到第三过渡体；吸去所述第三过渡体中的第二培养基和未贴壁的细胞和细胞碎片，并重新加入所述第二培养基在第二预设培养条件下进行培养，得到第四过渡体；对所述第四过渡体在第三预设培养条件下进行细胞传代培养，得到传代培养产物。

在本发明的制备方法中，所述将脐带进行脐带预处理，得到脐带组织，包括：采用酒精和生理盐水对脐带进行清洗；将清洗后的脐带剪成1-3cm的段状；将脐带的脐静脉内侧剖开脐带，将脐静脉、脐动脉以及脐带包膜从脐带中去除，得到脐带组织；和/或，所述预设消化条件为：37℃培养箱内消化30min，每15min摇晃1次；和/或，所述在所述第二过渡体中加入第二培养基重悬，并在第一预设培养条件下进行贴壁培养得到第三过渡体，包括：采用第二培养基对所述第二过渡体进行重悬，按照5000个/cm²接种在培养皿中，置于37℃，5％CO₂的培养箱内培养；贴壁培养8-15h后，吸去第二培养基、未贴壁的细胞和细胞碎片，得到第三过渡体。

在本发明的制备方法中，所述对所述传代培养产物进行预处理，得到第一液体，包括：在所述传代培养产物中添加生理盐水重悬，得到第一中间体；将所述第一中间体进行冻融、超声，得到第二中间体；对所述第二中间体进行过滤；将过滤后的第二中间体进行离心并收集离心后的液体，得到所述第一液体。

在本发明的制备方法中，所述将所述第一液体和第二液体混匀之前，还包括：在生理盐水中加入10-50ug/ml维生素C，1-10ug/ml胰岛素，1-10ug/ml人转铁蛋白，得到所述第二液体。

在本发明的制备方法中，所述冻干保护剂包括甘露醇、海藻糖和右旋糖酐-40；和/或，所述中间液包括：5％-15％甘露醇、0.1％-1％海藻糖、0.5％-1.5％右旋糖酐-40、冻干粉原液和水。