[发明专利]三明治结构分子印迹SERS基底及其制备方法与应用

权利要求书

1.三明治结构分子印迹SERS基底MIP@Au-GO，其特征在于，制备方法包括：

A、纳米金粒子溶液的制备；

B、氧化石墨烯的制备；

C、利用对氨基苯硫酚修饰纳米金粒子；

D、将修饰后的纳米金粒子结合在氧化石墨烯表面得Au-GO复合物溶液；

E、将Au-GO复合物溶液与双胍类化合物、甲基丙烯酸和乙二醇二甲基丙烯酸酯进行混合，在Au-GO复合物表面上形成双胍类分子印迹聚合物；其中，所述双胍类分子印迹聚合物是以双胍类化合物为模板分子，使双胍类化合物与聚合单体和交联剂在引发剂存在的条件下发生聚合反应，然后从反应产物中脱除模板分子而形成的。

2.根据权利要求1所述的分子印迹SERS基底，其特征在于，步骤A利用柠檬酸钠还原法制备纳米金粒子溶液，具体为：向圆底烧瓶中加入180～230mL一级水和4～8mL 1×10^-2～1.5×10^-2M氯金酸水溶液在油浴锅中加热，待刚好沸腾时加入2～6mL0.5～1.5％的柠檬酸钠水溶液，沸腾5～20min后停止加热，得到清亮酒红色的纳米金粒子溶液，于4℃保存。

3.根据权利要求1所述的分子印迹SERS基底，其特征在于，步骤B利用改良的Hummers法制备氧化石墨烯，具体为：分别称取1～2g石墨粉和6～8g高锰酸钾，加入到500mL的锥形瓶中，混匀，然后配制150～180mL的酸溶液，加入到锥形瓶中，待放热后置于摇床中，45～55℃震荡10～15h，取出后冷却至室温，再加入150～180mL冰水，搅拌至完全融化后滴加4mL双氧水，溶液由褐色变为黄色，然后用4～6％盐酸溶液洗至溶液中不再有硫酸根离子，再利用一级水洗至中性，离心浓缩后，-86℃～-70℃放置45～60h，最后冷冻干燥，将冻干后的产物粉碎，过150～250目筛，密封保存；

其中，所述酸溶液为硫酸和磷酸的混合液，其中，硫酸和磷酸的体积比为72:8。

4.根据权利要求2所述的分子印迹SERS基底，其特征在于，步骤C包括：将纳米金粒子溶液150～250mL与0.08～0.12mM对氨基苯硫酚水溶液100～300μL混合，搅拌8～16h得修饰后的纳米金粒子溶液。

5.根据权利要求4所述的分子印迹SERS基底，其特征在于，步骤D包括：向修饰后的纳米金粒子溶液150～250mL中加入0.8～1.2mg/mL氧化石墨烯水溶液2～5mL，搅拌18～30h，离心，收集沉淀，沉淀用水清洗后再次离心，反复用水洗3～5次后，使沉淀溶解分散在1～3mL水中，得到Au-GO复合物溶液。

6.根据权利要求1-5任一项所述的分子印迹SERS基底，其特征在于，步骤E中所述双胍类化合物是指双胍类降糖药，包括盐酸二甲双胍和/或盐酸苯乙双胍；和/或

所述引发剂为偶氮二异丁腈。

7.根据权利要求6所述的分子印迹SERS基底，其特征在于，步骤E包括：向盛有20～40mL二甲基亚砜的容器中加入0.5～1.5mL所述Au-GO复合物溶液，超声溶解，再加入0.3～0.6mmoL双胍类化合物和1～3mmoL甲基丙烯酸，超声条件下进行预聚合，再向反应体系中加入8～12mmoL乙二醇二甲基丙烯酸酯，继续超声，最后加入15～40mg偶氮二异丁腈，向容器中通入氮气排尽空气，进行聚合反应，所得反应产物干燥后碾磨，过150～250目筛，用甲醇乙酸溶液反复清洗以去除反应产物中的双胍类化合物；其中，甲醇乙酸溶液中甲醇和乙酸的体积比为8:2～9:1。

8.权利要求1-7任一项所述分子印迹SERS基底的以下任一应用：

1)用于双胍类降糖药的分离富集与纯化；

2)用于双胍类降糖药的定性及定量检测。

9.双胍类降糖药的检测方法，其特征在于，包括：将权利要求1-7任一项所述分子印迹SERS基底MIP@Au-GO加入样品溶液中，混匀后离心或静置，收集沉淀，干燥后利用拉曼光谱仪进行检测。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，样品溶液中盐酸二甲双胍的线性检测范围在0.2～1mg/mL，检出限为0.1mg/mL；和/或

样品溶液中盐酸苯乙双胍的线性检测范围在0.25～1.5mg/mL，检出限为0.1mg/mL。