[发明专利]一种抗新型冠状病毒N蛋白的中和抗体

说明书

本发明公开了一种抗新型冠状病毒N蛋白的中和抗体，它由轻链和重链组成，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明所述抗体能够特异性识别和结合SARS‑CoV‑2 N蛋白，实验结果显示，其与2019‑NCOV Nucleocapsid的亲和常数KD值为111nM，EC50值为3.975μg/mL；其与NCOV‑SARI‑N‑his的EC50值为4.752μg/mL。

技术领域

本发明涉及一种来自RNA病毒，具体涉及一种抗新型冠状病毒N蛋白的中和抗体。

背景技术

2019新型冠状病毒的病原体是新型冠状病毒(2019-nCoV，COVID-19或SARS-CoV-2)。SARS-CoV-2属冠状病毒科(Coro-naviridae)冠状病毒属(Coronavirus)，是一类有包膜的单股正链RNA病毒。新型冠状病毒基因编码多个结构蛋白，如N蛋白、M蛋白、E蛋白和S蛋白等，S蛋白可特异性地与宿主受体结合，是病毒入侵宿言易感细胞的关键蛋白，M蛋白和E蛋白参考病毒细胞膜的形成，而N蛋白则参与病毒的装配。这些蛋白包括多个抗原表位，利用抗原与抗体特异性结合的原理，可通过抗体检测抗原的存在，从而直接证明样本中含有新型冠状病毒。

新型冠状病毒传播迅速，具有极强的传染性。到目前为止，还没有专门用于预防的疫苗和治疗新型冠状病毒的特效药物，一般采用非特异性治疗，预防严重的并发症，降低重症发病率和死亡率，提高治愈率。目前，各研究机构多是致力于针对SARS-CoV-2的S蛋白研发抗体产品，如公开号CN111333722A的发明专利，采用噬菌体展示技术，构建了一个高容量的人源免疫性噬菌体抗体文库，并以SARS-CoV-2-S蛋白为靶标，筛选人源抗体单链抗体片段并获得了对SARS-CoV-2病毒有较强的中和作用的抗体。又如公开号为CN111303280A的发明专利，公开了一种抗SARS-CoV-2的全人源单克隆抗体，该单抗与S抗原的亲和常数KD是1.0nM。而针对新型冠状病毒N蛋白的抗体产品极少，仅见有公开号为CN111269313A的发明专利公开了一种抗N蛋白单克隆抗体，实验结果显示，采用间接ELISA法测定得到的抗体的相对亲和力为1.835×10^-10mol/L。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种与N蛋白亲和力较理想的抗新型冠状病毒N蛋白的中和抗体。

本发明所述的抗新型冠状病毒N蛋白的中和抗体，它由轻链和重链组成，其中轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

本发明所述的抗新型冠状病毒N蛋白的中和抗体的轻链的氨基酸序列如SEQ IDNO：3所示，重链的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。该抗体是针对新型冠状病毒N蛋白(SARS-CoV-2N蛋白)的抗体产品，所述的新型冠状病毒N蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示。

申请人发现，本发明所述抗体能够特异性识别和结合SARS-CoV-2N抗原蛋白，因此，本申请还包括该抗体在制备诊断新型冠状病毒的试剂，或者是在制备治疗新型冠状病毒的药物中的应用。

本申请进一步包括一种诊断和/或治疗和/或预防新型冠状病毒所致疾病的产品，其以本发明所述抗体作为活性成分。

与现有技术相比，本发明所述抗体能够特异性识别和结合SARS-CoV-2N蛋白，实验结果显示，其与2019-NCOV Nucleocapsid(原核表达N蛋白)的亲和常数KD值为111nM，EC50值为3.975μg/mL；其与NCOV-SARI-N-his(真核表达N蛋白)的EC50值为4.752μg/mL。

附图说明

图1为亲和柱纯化后的抗新型冠状病毒N蛋白的中和抗体SDS-PAGE检测图谱，其中M表示标准蛋白分子量；Me表示合并的培养基；FT表示流穿液；W表示洗涤液；E表示纯化后的抗新型冠状病毒N蛋白的中和抗体。