[发明专利]褪黑素在制备骨髓间充质干细胞动员剂中的应用

说明书

本发明公开了褪黑素在制备骨髓间充质干细胞动员剂中的应用，并公开了一种包括褪黑素的骨髓间充质干细胞动员剂。褪黑素作为骨髓间充质干细胞动员剂能实现骨髓中BMSCs向外周血的有效动员，并且能够有效提高外周血中BMSCs的增值能力和定向分化能力，其作为BMSCs良好的动员剂有望应用于组织工程和再生医学，为今后大规模、高效率实施干细胞治疗提供新的希望。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及褪黑素在制备骨髓间充质干细胞动员剂中的应用。

背景技术

骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）是当前医药研究领域应用最为广泛的多能干细胞。因其具备良好的体外扩增能力以及强大的多向分化潜能，BMSCs已成为治疗诸多退行性疾病如骨关节炎、骨质疏松、椎间盘退行性变的关键种子细胞。

然而，在实际临床应用与转化过程中，BMSCs的提取和分离仍存在诸多的局限性。首先，BMSCs的临床应用伴随着更长的周期和更多的不确定因素，而目前常规制备方法获取的细胞产量往往过低，难以满足临床的需求。此外，常规分离获取的细胞常伴随着增殖和分化能力的下降以及细胞干性难以维持等问题，导致其在实际临床应用时难以获得满意的疗效。因此，亟需更为有效的方式在体内对细胞进行干预，增加骨髓间充质干细胞的增殖和分化能力进而为实际治疗创造条件。

细胞动员（Cell mobilization）为解决上述的难题提供了可能。动员是指通过使用特定的干细胞动员剂或动员方法促使骨髓中的BMSCs向外周血迁移，BMSCs的体内动员一方面避免了体外培养再输注治疗带来的污染风险，另一方面也能最大限度地保留干细胞的体内活性。在造血干细胞移植领域，细胞动员已经被大量研究同时在临床治疗中取得了满意的疗效。但对于BMSCs动员剂的研究结果却不尽如人意，目前报道的动员剂均难以实现对BMSCs的有效动员。因此，对BMSCs动员剂的深入探索研究具有重要意义。

发明内容

基于当前BMSCs动员剂的匮乏以及动员方式的不足，本发明的目的在于提供一种BMSCs的动员方法，并初步证实了基于褪黑素的动员方式能有效实现骨髓中BMSCs向外周血的迁移，同时动员后的BMSCs较对照组具有更强大的增殖能力和成骨分化能力，提示了褪黑素及其相关制剂可以作为一种BMSCs的有效动员剂提高细胞产量的同时保证细胞的活力，为干细胞的临床治疗提供了新的参考。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

褪黑素在制备骨髓间充质干细胞动员剂中的应用。

进一步的，所述骨髓间充质干细胞动员剂用于干细胞移植治疗。

一种骨髓间充质干细胞动员剂，包括以上所述的褪黑素。

本发明所述的骨髓间充质干细胞动员剂的剂型为注射剂。

本发明选取SD大鼠作为实验动物，分组如下：传统提取组（20只），尾静脉注射0.9%的生理盐水，频率为每日一次，干预时间为一周；褪黑素动员组（20只），尾静脉注射10mg/kg的褪黑素溶液，频率为每日一次，干预时间为一周。

获取两组大鼠的外周血细胞进行传代培养，通过对比两组BMSCs表面抗原CD34、CD45、CD29、CD90的表达水平，评估褪黑素对骨髓中BMSCs向外周血动员的效果；通过对比两组BMSCs的增殖能力评估褪黑素动员组细胞的增殖能力；通过对比两组BMSCs的成骨分化能力评估褪黑素作为动员剂对BMSCs的定向分化能力。