[发明专利]一种自体细胞移植方法

说明书

本发明涉及细胞移植技术领域，且公开了一种自体细胞移植方法，包括以下步骤：1)患者术前应行血常规、尿常规、大便常规、心电图、肝功能、肾功能、艾滋病病毒和乙型肝炎表面抗原等检查；2)在无菌室中，从人体耳后或上臂内侧用75％乙醇消毒皮肤，然后用1％利多卡因和1/100000肾上腺素进行局部表面麻醉，取l cm×l cm的表皮和真皮，放人提前预备好的组织保存液中，创伤部缝合一针，以创可贴覆盖。该自体细胞移植方法，通过获取美容者自体皮肤组织中的成纤维前体细胞，培养出能分泌自体胶原蛋白和弹性蛋白的成纤维细胞，在体外大量扩增，再回输到美容者的皱纹部位，极少数患者在术后24h内注射部位有轻度肿胀和麻木等感觉，未经处理会自然消失。

技术领域

本发明涉及细胞移植技术领域，具体为一种自体细胞移植方法。

背景技术

当前的美容医学发展趋势朝着简单、微创和安全的方向发展，面部老化的治疗也从过去的手术治疗向生物医学制剂注射治疗的方向转化，主要的生物注射制剂有胶原蛋白、透明质酸、胚胎干细胞和肉毒素等，除肉毒素是作用于面部动态皱纹外，其余均是用于治疗皮肤老化所致的细小皱纹，其中胶原蛋白和透明质酸是真皮组织细胞外基质的主要成分，在皮肤中主要起生物替代作用，使老化皮肤中逐渐减少的真皮与细胞外基质得到补充，具有除皱效果明显和起效快的特点，但上述制剂多数是异体或异种成分，存在免疫排斥和过敏反应的可能，且生物代谢作用使之很快降解，效果持续时间短暂是这类产品的主要缺点。

胚胎干细胞也是近年开发的生物美容产品，它具有持续的生物美容效果和免疫原性的特点，但胚胎干细胞的来源有限，提纯与保存困难，不能完全排除免疫反应是其缺点，中国专利CN 101033462 B中公开了一种真皮成纤维样细胞克隆的制备方法，该方法中的真皮成纤维样细胞可用于制备骨移植物、软骨移植物、脂肪移植物、肌腱移植物和皮肤移植物或注射于体表用于除皱和美容，成纤维细胞是皮肤的主要细胞成分，成纤维细胞具有合成和分泌三种纤维APSC多能细胞以及基质的功能，在间质的更新和创伤修复过程中，具有十分重要的作用，人体的皮肤分为表皮和真皮两层，真皮组织构成了皮肤的支架结构，是影响皮肤弹性与韧性的主要成分，真皮主要由胶原蛋白构成，胶原蛋白成分的多少直接影响着皮肤组织的厚度与弹性，随着皮肤的衰老，真皮组织中成纤维细胞与其所分泌的胶原蛋白的减少，是皮肤出现各种皱纹的主要原因，为皮肤提供足够数量的成纤维细胞是应用成纤维前体细胞进行生物除皱的主要机制，成熟的成纤维细胞增殖与分泌活力有限，研究发现成纤维细胞是由成纤维前体细胞成熟演化而来，目前市面上的成纤维细胞移植方法存在着除皱效果一般，治疗效果有待提高，故提出一种自体细胞移植方法以解决上述问题。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种自体细胞移植方法，具备除皱效果好的优点，解决了目前市面上的成纤维细胞移植方法存在着除皱效果一般，治疗效果有待提高的问题。

(二)技术方案

本发明要解决的技术问题是提供一种自体细胞移植方法，包括以下步骤：

1)患者术前应行相关检查；

2)在无菌室中，从人体耳后或上臂内侧用75％乙醇消毒皮肤，然后用1％利多卡因和1/100000肾上腺素进行局部表面麻醉，取lcm×lcm的表皮和真皮，放人提前预备好的组织保存液中，创伤部缝合一针，以创可贴覆盖；

3)标本取材后立即置于组织保存液中，放在2-10摄氏度的保温箱中保存，于6-8h内进行细胞分离和增殖培养并经检验合格；

4)培养第六周将O.1ml细胞悬浮液对受术者进行皮试，以确保无免疫排斥反应；

5)第七周取2-4ml细胞悬浮液做真皮内注射，用3ml的注射器和2.2cm长的4.5号针头注射，将皱纹部位或瘢痕部位用75％乙醇消毒，局部注射1％利多卡因，或表皮用2.5％利多卡因和2.5％丙胺卡因软膏麻醉，注射完后用冰袋外敷2-4h；