[发明专利]一种玻璃化冷冻液套装及其制备方法有效
申请号: | 202010633376.1 | 申请日: | 2020-07-02 |
公开(公告)号: | CN111602653B | 公开(公告)日: | 2021-03-02 |
发明(设计)人: | 林小贞 | 申请(专利权)人: | 深圳韦拓生物科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 深圳市德锦知识产权代理有限公司 44352 | 代理人: | 丁敬伟 |
地址: | 518000 广东省深圳市坪山新区坪*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 玻璃化 冷冻 套装 及其 制备 方法 | ||
1.一种玻璃化冷冻液套装,其特征在于,所述套装由基础液、冷冻液1和冷冻液2组成;所述基础液的组分及配比为每1L M199组织培养液含15mM HEPES和10mg/mL人血白蛋白;冷冻液1的组分及配比为每1L基础液含乙二醇7.45%(v/v),二甲基亚砜7.45%(v/v);冷冻液2的组分及配比为每1L基础液含乙二醇15%(v/v),二甲基亚砜15%(v/v),蔗糖1M。
2.如权利要求1所述的玻璃化冷冻液套装,其特征在于,所述基础液的参透压为280-300mOsm/Kg。
3.一种如制备权利要求1所述玻璃化冷冻液套装的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)按配比量取HEPES及人血白蛋白,并加入M199组织培养液中搅拌混匀,获得基础液;
(2)按配比分别量取乙二醇、二甲基亚砜加入到适量基础液中混匀,并用基础液定容至配制量获得冷冻液1;
(3)按配比称量蔗糖,溶于基础液中;
(4)按配比分别量取乙二醇,二甲基亚砜并加入步骤3所述含蔗糖的基础液并混匀,获得冷冻液2;
(5)将获得的基础液、冷冻液1和冷冻液2进行除菌过滤并分装至无菌PP管中并封装。
4.如权利要求1所述的玻璃化冷冻液套装在配子和胚胎的冷冻和保藏中的应用。
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