[发明专利]一种抗消化系统肿瘤的浆水无细胞培养液

说明书

本发明涉及生物制药技术领域，尤其涉及一种抗消化系统肿瘤的浆水无细胞培养液及其制备方法和应用，所述的浆水无细胞培养液通过以下方法制备：取浆水加入RPMI培养基或DMEM培养基重悬沉淀，恒温培养，离心获得的培养液即为浆水无细胞培养液。所述的浆水中含有植物乳杆菌、副干酪乳杆菌、木糖葡萄球菌和发酵乳杆菌中的一种或者几种，所述的浆水无细胞培养液对结直肠癌、胃癌、肝癌和胰腺癌均具有较强抑制作用，且所述的浆水无细胞培养液来源于食品，是浆水的主要成分，安全，副作用小。

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，尤其涉及一种抗消化系统肿瘤的浆水无细胞培养液及其制备方法和应用。

背景技术

2017年WHO统计表明，2015年共有5600万人口死亡，其中非传染性疾病(NCD)死亡人数4000万，占总人口数的70％。癌症作为NCD导致死亡第二原因占22％。2012年全球癌症统计结果表明，世界范围内结直肠癌(colorectal cancer，CRC)在发达国家的死亡率及发病率均位列前三，在发展中国家其男女发病率及死亡率均位列前三。近年来，在我国CRC发病率及死亡率为14.2/10万和7.4/10万，均居第五位。现阶段我国结直肠癌发病率明显上升，其在41-65岁人群中发病率最高，且呈现稳定的增长趋势。目前，治疗结肠癌的主要是通过手术切除，术后服用5-Fu等化疗药物防止肿瘤复发。但目前，5-Fu等一线化疗药物一般作用于细胞的DNA结构影响其增殖，缺乏选择性，靶向性。

浆水是一种历史悠久的发酵食品，特别在我国西北地区，其深受人们的喜爱。研究发现浆水具有诸多的益生功能如：促进消化、调节血脂、维持肠道稳态等功能，并且在对于糖尿病、高血压、消化系统癌症等预防方面具有潜在的应用价值。浆水在中华传统药物典籍中一直是被看作为治疗胃肠道和呼吸道疾病的良药。浆水中含有丰富的益生菌资源，且其中的微生物经过几千年的自然驯化和选择，一些具有益生功能特性的微生物得以保存，这些适应于东方人肠道益生菌的资源为研究开发提供了广阔的资源。研究人员对多种采用传统工艺制备的浆水的微生物群落进行了系统分析，发现植物乳杆菌、副干酪乳杆菌、木糖葡萄球菌和发酵乳杆菌等益生菌中的一种或几种是浆水的高丰度菌群，即使浆水的来源不同，其优势菌群的种类基本相同。

发明人意外地发现，将浆水加入RPMI培养基或DMEM培养基发酵后获得的浆水无细胞培养液对结直肠癌、胃癌、肝癌和胰腺癌细胞均具有较强抑制作用，且具有低毒高效的特点。

发明内容

针对上述技术问题，本发明的第一目的是提供一种浆水无细胞培养液，所述的浆水无细胞培养液通过以下方法制备：

取浆水加入RPMI培养基或DMEM培养基重悬沉淀，恒温培养，离心获得的培养液即为浆水无细胞培养液。

进一步地，所述的浆水中含有植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)、木糖葡萄球菌(Staphylococcusxylosus)和发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)中的一种或者几种。

进一步地，所述的浆水中含有植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)、木糖葡萄球菌(Staphylococcusxylosus)和发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)。

进一步地，所述的浆水无细胞培养液通过以下方法制备：

(1)取浆水离心，弃上清液，用MRS培养基将其下层沉淀重悬，恒温培养，得浆水初级培养物，离心弃上清，浆水一级培养物沉淀备用；

(2)用RPMI培养基或DMEM培养基重悬步骤(1)中浆水初级培养物沉淀，调节pH至细胞最适pH，恒温培养，得浆水二级培养物；