[发明专利]一株巴氏杆菌噬菌体、其噬菌体组合物及其应用

说明书

本发明公开了一株巴氏杆菌噬菌体、其噬菌体组合物及其应用，该噬菌体被命名为vB_PmuP_PS01，于2020年05月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物学中心，其保藏编号为CGMCC No.19971。该噬菌体对兔源巴氏杆菌具有较强的裂解作用，可以有效防控家兔养殖场巴氏杆菌病，减少多杀性巴氏杆菌引起的兔群败血症和出血性炎症，且使用安全、无副作用，在解决因巴氏杆菌造成的感染的同时，避免了因使用抗生素造成的抗生素残留、以及诱发耐药性巴氏杆菌的问题。此外，该噬菌体的应用广泛，还可用于制备饲兔料添加剂、以及环境、饲料消毒剂、检测试剂盒等。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一株巴氏杆菌噬菌体及包含该噬菌体的组合物及其应用。

背景技术

多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocida，Pm)是一类能引起畜、禽、宠物、野生动物及人类感染，并严重发病的重要人畜共患性病原菌。研究报道，该病原菌广泛流行于世界各地，无宿主特异性，可通过相互接触经呼吸道进行水平和垂直传播；Davies等2004年报道该菌甚至可以在不同的宿主间发生种间传播。自从1959年WHO将巴氏杆菌病定为一类重要的动物传染病，Pm就一直受到各国学者的关注。

兔巴氏杆菌病又名出血性败血症，是由多杀性巴氏杆菌引起的一种多型性、散发性或地方流行性、细菌性传染病，该病病原菌是一种条件性致病菌。兔巴氏杆菌病是由Fo型多杀性巴氏杆菌引起的，其血清型为7:A、5:A，该菌一般寄生于兔鼻腔黏膜和扁桃体内，正常情况一般不引起发病，但当外界应激过大或动物机体抵抗力较低下时家兔会发病，而且该病一旦在地区内流行，兔群则很难在短时间内净化；如不及时采取有效措施还会引起家兔慢性消耗性疾病的发生，致使其生长缓慢，料肉转换率降低或大批死亡，给养兔业造成严重的损失。传统的治疗方法是采用抗生素，巴氏杆菌对阿莫西林、先锋Ⅵ、先锋Ⅴ、丁胺卡那霉素具有较强的耐药性，由于抗菌药物的滥用，使兔巴氏杆菌的耐药菌株大量出现，给此病的临床防治带来了困难。因此，研发一种疗效显著、使用安全的新型噬菌体制剂用于防治兔巴氏杆菌病迫在眉睫。

噬菌体治疗有几大优势，首先是增殖效率高，一个噬菌体可产生数百子代，而这种能力也是该治疗方式的一个显著优势，在治疗时起着至关重要的作用；使用噬菌体进行治疗无副作用，这一点可与抗生素治疗相区别，使用抗生素进行治疗不仅会清除引起感染的菌属，还会对肠道内的其它菌群造成影响，引起微生态的失衡，引起机体免疫力下降，而噬菌体具有专一性，且不会对其它种属的细菌产生影响；噬菌体治疗无需考虑残留问题，他是严格宿主依赖性生物，不会在动物体内残留。

但是，目前还没有出现有效的巴氏杆菌噬菌体，能用于防治由于巴氏杆菌感染导致的各类疾病，因此，现有技术有待进一步改进。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一株广谱强裂解性的巴氏杆菌噬菌体vB_PmuP_PS01，由该噬菌体复配的噬菌体组合物；该噬菌体不仅可用于制备预防和治疗兔巴氏杆菌感染的疾病的药物，还可用于制备饲兔料添加剂、以及环境、饲料消毒剂等。该噬菌体及其噬菌体组合物使用安全、无副作用，在解决因巴氏杆菌造成的感染的同时，避免了因使用抗生素造成的抗生素残留、以及诱发耐药性巴氏杆菌的问题。

本发明的技术方案具体如下：

第一方面，本发明提供了一株广谱强裂解性的巴氏杆菌噬菌体vB_PmuP_PS01，该噬菌体自山东青岛某养殖场的兔粪中分离得到的，已于2020年05月15日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.19971。

巴氏杆菌噬菌体vB_PmuP_PS01在双层琼脂培养基上可形成直径约0.5～1.5mm、透亮的圆形噬菌斑，边界清照。电镜下观测到：该噬菌体的头部呈直径55nm左右的多面体，非伸缩性尾部长20nm，根据国际病毒分类委员会(The International Committee onTaxonomy of Viruses，ICTV)第九次报告的分类标准，可确定该噬菌体为短尾噬菌体科，命名为vB_PmuP_PS01。