[发明专利]一种中国小麦花叶病毒CWMV的接种方法有效
| 申请号： | 202010608730.5 | 申请日： | 2020-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN111713288B | 公开（公告）日： | 2022-08-26 |
| 发明（设计）人： | 钟凯丽;程晔;张帆;刘婷婷;刘芃;羊健;陈剑平 | 申请（专利权）人： | 宁波大学 |
| 主分类号： | A01G7/00 | 分类号： | A01G7/00 |
| 代理公司： | 北京圣州专利代理事务所(普通合伙) 11818 | 代理人： | 朱芳斌 |
| 地址： | 315211 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 中国 小麦 花叶 病毒 cwmv 接种 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种中国小麦花叶病毒CWMV的接种方法，包括以下步骤：将茎叶总长度为4～8cm的小麦幼苗置于CWMV浸润液中，在标准大气压下进行抽真空处理25～35min，然后将小麦幼苗移栽至土壤中进行培养；
所述CWMV浸润液包括CWMV RNA1、CWMV RNA2和P19沉默抑制子；
每一株小麦幼苗置于400～600μL的CWMV浸润液中；
所述CWMV浸润液以MES缓冲液为溶剂，其中所述CWMV RNA1、CWMV RNA2和P19沉默抑制子在所述CWMV浸润液中的OD 600值分0.6～0.8，0.6～0.8和0.6～0.8；
所述抽真空处理过程中，每隔8～12min停止一次，去除CWMV浸润液中的气泡；
小麦幼苗移栽至土壤中培养的时间为7～28d；
所述培养的温度为7～9℃，所述培养的光照周期L:D为14:10；所述培养的湿度为73％～78％；
所述小麦幼苗的培育方法包括以下步骤：将小麦种子在自来水中24～26℃浸泡10～14h后获得芽头露白的种子；将所述芽头露白的种子保湿培养3～4d获得小麦幼苗。
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