[发明专利]一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基

权利要求书

1.一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基，其特征在于，按照质量体积比计，培养基包括：胰蛋白胨5-15，酵母粉4-6，Na Cl 8-12，营养土20-30，芦苇基质20-30，琼脂粉10-30，蒸馏水800-1500；采用该培养基培养野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，包括以下步骤：

(1)培养基的制备：在去离子水中加入胰蛋白胨、酵母粉和NaCl，搅拌直至各溶质溶解用，摩尔浓度为1mol/L的NaOH溶液调节pH值至6.0，然后加入营养土、芦苇基质和琼脂粉，最后用去离子水定容至1000 mL，将已制备好的培养基趁热分装于试管内，每支10 mL，用硅胶塞塞紧试管口，按每10支为一捆，用报纸或牛皮纸包紧有硅胶塞的一端，放入高压灭菌锅内灭菌，压力1.0-1.5 kg/cm²，温度115-121 ℃，时间20-30 min，取出试管摆斜面，冷却凝固后为母种培养基；

(2)野生毛柄钉灰包子实体组织分离：在野生毛柄钉灰包分布区采集其幼嫩子实体，未开伞，用报纸或透气袋包裹子实体，带回实验室进行菌种分离，用刷子将子实体表面杂质清理干净，用75％酒精仔细擦拭子实体表面进行消毒，在无菌条件下，将子实体纵向掰开，用灼烧杀菌的镊子或手术刀在掰开的新鲜子实体截面上取出黄豆粒大小的子实体菌肉组织，接种至步骤(1)所得专用母种培养基斜面上；

(3)将接种好的菌种放置于22-28℃恒温培养箱暗培养，待菌丝体长好后备用，取生长快，无杂菌污染的菌丝块再次移入另一斜面培养基表面，22-28℃培养20-30d，菌丝长满斜面且无杂菌，即为野生毛柄钉灰包母种，获得野生毛柄钉灰包。

2.根据权利要求1所述的一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基，按照质量体积比计，其特征在于，培养基包括：胰蛋白胨10，酵母粉5，Na Cl 10，营养土25，芦苇基质25，琼脂粉20，蒸馏水1000。

3.根据权利要求1所述的一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基，其特征在于，所述芦苇基质使用前需晒干粉碎，过40目筛。

4.根据权利要求1所述的一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基，其特征在于，所述的营养土使用前需晒干粉碎，过40目筛。