[发明专利]一种用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法在审
| 申请号: | 202010595536.8 | 申请日: | 2020-06-28 |
| 公开(公告)号: | CN111635916A | 公开(公告)日: | 2020-09-08 |
| 发明(设计)人: | 马霞;袁洪洁;杨承诚;何艳 | 申请(专利权)人: | 上海应用技术大学 |
| 主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P19/08 |
| 代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 徐俊;吴宝根 |
| 地址: | 200235 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 酵母 聚糖 提取 预处理 方法 | ||
1.一种用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1):将酵母细胞加入到蒸馏水中,搅拌均匀形成悬浮液,反复清洗,离心后得到沉淀物;
步骤2):将沉淀物加入到磷酸缓冲液中配置成待提取液,加压蒸汽处理30-60min,冷却至室温,离心,反复清洗得到沉淀物;
步骤3):将步骤2)得到的沉淀物加入到蒸馏水中配置成悬浮液,加入甘露聚糖酶,调节pH值,恒温酶解;冷却至室温后,抽滤除去酶颗粒,将过滤液进行升温灭酶活,离心、水洗,得到不溶物;
步骤4):将不溶物加入到蒸馏水中均匀搅拌形成悬浮液,超声提取1-2h,透析后冷冻干燥得到酵母β-葡聚糖粉末。
2.如权利要求1所述的用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,所述步骤1)中的悬浮液中酵母细胞的浓度为15-45g/L。
3.如权利要求1所述的用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,所述步骤1)中的离心条件为:离心力4500g,离心时间10min。
4.如权利要求1所述的用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,所述步骤2)中磷酸缓冲液采用PBS,其浓度为20mM,pH值为7.5。
5.如权利要求1所述的用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,所述步骤2)中的待提取液中沉淀物的浓度为100-190g/L。
6.如权利要求1所述的用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,所述步骤2)中加压蒸汽处理的温度为90-121℃。
7.如权利要求1所述的用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,所述步骤3)中沉淀物与蒸馏水的质量比为1:20;甘露聚糖酶的加入量为悬浮物质量的1-10%。
8.如权利要求1所述的用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,所述步骤3)中加入甘露聚糖酶后,将悬浮液的pH值调至6.0;恒温酶解的温度为50-70℃,时间为60min;升温灭酶活具体为煮沸5min;离心的转速为10000r/min,时间为10min。
9.如权利要求1所述的用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,所述步骤4)中不溶物的质量为蒸馏水质量的5%。
10.如权利要求1所述的用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法,其特征在于,所述步骤4)中超声提取的工艺参数为:超声功率600~800w,持续1s,间隔1s,探头直径25mm;透析的时间为24~48h,所用透析袋截留分子量为14000;冷冻干燥具体为:先-80℃预冷冻22h,然后-60℃冷冻干燥12-24h。
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