[发明专利]抗CCR4抗体及其在治疗癌症中的应用

说明书

本发明涉及一种特异性结合CCR4的抗体及其在治疗癌症中的应用。所述抗体能够以较高的亲和力结合CCR4阳性细胞，阻断CCL17、CCL22与肿瘤细胞表面的CCR4结合，促进效应细胞对肿瘤细胞的ADCC作用，为癌症的治疗和/或预防提供新的可能。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体的涉及抗CCR4抗体及其在治疗多种血液系统恶性肿瘤和实体瘤中的应用。

背景技术

趋化因子受体是表达在一些特定的细胞表面的七次跨膜受体，其编码蛋白属于G蛋白偶联受体家族，根据其配体的不同可分为四类： CXC型、XC型、CC型、CX₃C型。CC型趋化因子受体4(CCR4)又称为 CD194，主要表达在T细胞(尤其是Th2细胞及Treg细胞)上，在树突状细胞、巨噬细胞、NK细胞、血小板、肥大细胞及某些肿瘤细胞上也发现有表达。CCR4有三个天然特异性配体：胸腺活化调节趋化因子(TRAC/CCL17)、巨噬细胞衍化趋化因子(MDC/CCL22)、趋化素样因子1(CKLF1)。

随着CCR4及其三个配体的发现，越来越多的研究表明CCR4及其配体CCL17、CCL22、CKLF1的结合与T细胞白血病、淋巴瘤细胞肿瘤以及实体瘤的生物学行为、转移密切相关。Lee等检测研究胃癌细胞系，发现它们均表达了CCR4，而在正常胃组织上皮中并未发现CCR4的表达，且CCR4阳性表达与胃癌大体分型、侵袭深度、淋巴结转移、病理分期、复发、总体生存期均具有显著相关性。并且还在小鼠乳腺癌模型中证明CCR4过表达可促肿瘤增大，敲除CCR4基因可诱导肿瘤变小。体外的小鼠胃癌腹膜转移模型发现，CCR4表达阳性的胃癌细胞进入腹腔后，可刺激大网膜乳斑的巨噬细胞分泌CCL22，二者结合从而趋化诱导胃癌腹膜转移。也有研究显示，趋化因子受体CCR4与乳腺癌HER2表达、淋巴结转移相关。此外，Biragyn等报道靶向干扰CCR4﹢Tregs细胞可降低乳腺癌细胞的转移潜能，甚至阻滞乳腺癌肺转移。通过阻断CCR4与CCL17和CCL22的结合，减少肿瘤附近的Treg细胞，从而维持机体自身抗肿瘤免疫能力，因此CCR4成为抗肿瘤药物的潜在理想靶标。

现有技术中已有一些公开的CCR4抗体，如CN107250160A、 CN104436191A、CN103328513B、US20170290911等，但对新的抗CCR4 抗体仍然存在很大的需求。

发明内容

基于上述发现，本发明的首要目的在于提供一种新的、亲和力较高且能阻断CCR4与配体结合的CCR4抗体。

本发明提供以下技术方案：

一种人源化抗CCR4抗体，由重链和轻链组成，重链和轻链分别包括可变区和恒定区，其中重链可变区序列为SEQ ID NO:1，轻链可变区序列为SEQ ID NO:2。

本发明所述CCR4抗体重轻链可变区各有3个互补决定区(CDR)。所述CCR4抗体的重链可变区3个CDR序列分别为SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5；轻链可变区3个CDR序列分别为SEQ ID NO:6、 SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8。

本发明所述CCR4抗体的重链和轻链进一步包含恒定区，所述抗体轻链恒定区包含人源κ、λ链序列,进一步优选为κ链。所述抗体重链恒定区包含人源IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgD、IgA、IgE或 IgM，进一步优选为IgG1。

在一些实施方案中，所述CCR4抗体能够拮抗CCR4活性，其中拮抗作用阻断CCR4与配体CCL17、CCL22间的结合，阻断CCR4的活性。

在一些实施方案中，可以将本发明CCR4抗体拮抗剂用于治疗癌症，包括但不限于：皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)、霉菌肉芽肿病(MF)、原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤(皮肤ALCL)、成人T细胞白血病/ 淋巴瘤(ATLL)、肾细胞癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、结肠癌、宫颈癌、脑癌、肝癌、胰腺癌、肾癌或胃癌。