[发明专利]一种基于金纳米修饰的手性毛细管电色谱开管柱、制备方法及应用

权利要求书

1.一种手性药物分离方法，其特征在于，具体步骤如下：

(A)先将手性药物用溶剂溶解，配制成浓度1mg/mL的样品溶液；

(B)然后将手性选择剂溶于40mmol/L的Tris溶液中，滴加体积浓度为30％的磷酸溶液，得到运行缓冲液；该运行缓冲液的pH为6.0到8.0，该运行缓冲液还包含甲醇，甲醇的体积分数为0％、10％、20％、30％或40％；

(C)利用手性毛细管电色谱开管柱，采用步骤(B)所得运行缓冲液，步骤(A)所得样品溶液进样，进行毛细管电泳，即可实现手性药物的分离；

所述手性药物为阿替洛尔、索他洛尔或比索洛尔；采用羧甲基-β-环糊精作为手性选择剂，其质量浓度为2.0％；

所述手性毛细管电色谱开管柱的制备方法，具体步骤如下：

(1)先将空心的毛细管柱内表面进行硅烷化处理，得到硅烷化的毛细管柱；

(2)然后利用甲基丙烯酸缩水甘油酯与硅烷化的毛细管柱内表面进行反应，得到GMA柱；

(3)再将GMA柱内表面与谷胱甘肽反应，得到GSH-GMA柱；

(4)最后对GSH-GMA柱利用金纳米修饰，即得所述的一种基于金纳米修饰的手性毛细管电色谱开管柱；

步骤(1)的具体方法是：先对毛细管柱进行活化处理，然后将体积浓度50％γ-MAPS甲醇溶液冲入活化后的毛细管柱中，封端，置于55℃水浴锅中反应10-14小时，取出，甲醇冲以除去未反应的γ-MAPS，氮气冲干备用；

步骤(2)的具体方法是：先将甲基丙烯酸缩水甘油酯溶于甲苯制成质量浓度10％的溶液，然后加入0.75mg/mLAIBN作为热引发剂，得到混合液，再将混合液冲入硅烷化的毛细管柱内，封端，80℃水浴反应10-14小时，甲醇和水交替冲洗柱子以除去未反应的反应物；

步骤(3)的具体方法是：先将谷胱甘肽溶于50mmol/L磷酸缓冲液中配制成1mol/L的溶液，调节pH＝8.0，得到GSH溶液，再将GSH溶液冲入GMA柱中，封端，40℃反应10-14小时，冲水除去未反应的GSH；最后利用50mmol/L的TCEP溶液冲洗毛细管柱，用来断裂可能形成的二硫键，冲水以除去未反应的TCEP；

步骤(4)的具体方法是：将新鲜配制的金纳米胶体冲入GSH-GMA柱中，直至整个毛细管柱变为红色且柱顶端有红色液滴冒出，用水冲去未反应的金纳米，即得Au-GSH-GMA柱。