[发明专利]一种从蔗糖异构酶酶解液中分离制备海藻酮糖的方法

权利要求书

1.一种从蔗糖异构酶酶解液中分离制备海藻酮糖的方法，其特征在于：

（1）对蔗糖异构酶酶解液进行脱色，所述脱色采用大孔树脂；

（2）对脱色后的蔗糖异构酶酶解液进行固相萃取处理，除去大分子杂质以及残余色素；

（3）对固相萃取后的蔗糖异构酶酶解液进行浓缩；

（4）对浓缩后的蔗糖异构酶酶解液在色谱柱上进行亲水作用色谱分离制备，收集海藻酮糖馏分、进行浓缩，获得海藻酮糖；

步骤（4）所述色谱柱的色谱柱填料是以硅胶为基质的键合材料，所述键合材料的键合相为亲水基团，所述亲水基团为半胱氨酸和组氨酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中的蔗糖异构酶酶解液为由蔗糖通过蔗糖异构酶异构反应所得到的酶解液，或者是由蔗糖通过蔗糖异构酶异构反应得到酶解液后，酶解液进一步生产异麦芽酮糖后得到的废糖浆。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中的蔗糖异构酶酶解液进行脱色时的上样量为：按照蔗糖异构酶酶解液中还原糖含量计算，上样量为大孔树脂质量的0.1%－10%。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：采用大孔树脂对蔗糖异构酶酶解液进行脱色时，所述脱色的方法为：采用体积比10%－20%乙醇-水溶液对大孔树脂进行淋洗、再采用体积比30%－60%乙醇-水溶液对大孔树脂进行洗脱，淋洗和洗脱所用乙醇-水溶液的体积为3－10倍柱体积，收集洗脱液进行浓缩。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）的固相萃取采用C18 SPE填料，固相萃取处理中蔗糖异构酶酶解液的上样量按照还原糖的含量计算，为C18 SPE填料质量的0.2%－20%；固相萃取处理的淋洗液为水，淋洗液体积为1－10倍柱体积，收集上样液和淋洗液并合并。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述色谱柱的色谱柱填料的粒度为2－20微米，色谱柱的内径为2.1－100毫米，色谱柱柱长为50－500毫米；亲水作用色谱分离制备采用的流动相为乙腈或甲醇与水混合，其中乙腈或甲醇不含或含有0.1－1 v%甲酸，水相中不含或含有0.1－1 v%甲酸；洗脱条件按水相体积分数5－30%等度或经10－50分钟水相体积分数由5－10%提高到30－50%梯度进行；制备时流动相流速为 0.2－100 mL/min，柱温为室温或 25－40 ℃，进样量以还原糖质量记，为色谱柱填料的0.05－2wt%；检测器为示差折光检测器或者蒸发光散射检测器，收集海藻酮糖馏分，旋转蒸发、冷冻干燥，得到海藻酮糖。

7.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于：浓缩的方式包括真空旋转蒸发。