[发明专利]一种鸡腺病毒卵黄抗体全蛋喷干粉的制备方法

说明书

本发明公开了一种鸡腺病毒卵黄抗体全蛋喷干粉的制备方法，包括为蛋鸡注射腺病毒疫苗，对卵黄中的卵黄抗体进行免疫学检测，腺病毒的卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:15以上时收集鸡蛋；将收集的鸡蛋进行清洗消毒，之后在无菌条件下打蛋，将整蛋液加水搅拌，然后分别进行酵母除糖、胃蛋白酶酶切蛋白步骤，之后进行温浴，冷却、喷干即得。由本发明提供的制备方法得到的全蛋抗体粉剂溶解性好，抗体损失少，抗体活性高，并且成本大大减少，具有较好的经济效益和社会效益。

技术领域

本发明涉及抗体药物领域，特别是涉及一种鸡腺病毒卵黄抗体全蛋喷干粉的制备方法。

背景技术

卵黄抗体提取于新鲜鸡蛋的蛋黄，因为鸡蛋含水量高（平均值在 70%以上）在储存过程中易受周围温度、湿度、储存方法及储存时间等的限制，易腐败变质。然而将卵黄抗体提取后进行处理得到粉状蛋黄粉，不但能阻止微生物生长又能减缓化学反应速度，有利于抗体的储存及运输。处理后得到的蛋黄粉使用更加简便，不仅可任意调节稀释倍数，控制抗体浓度，还能作为添加剂，添加于兽药中。

但是市面上存在的卵黄抗体喷雾干燥技术使用的是卵黄，并且卵黄液还经过沉降后才喷雾干燥，虽然得到的卵黄抗体较为纯净，但卵黄与卵清分离过程中以及卵黄沉降过程中相当一部分的卵黄抗体会丢失，而且过多的纯化抗体也会造成成本的增加，卵黄抗体喷雾干燥前越纯净，喷雾干燥后损失的越多，这是因为鸡蛋的某些物质能够对抗体起到保护作用。

虽然目前也存在全蛋粉喷干工艺的研究，但是这些方法都存在着喷干温度过高，喷干后溶解性不好等问题，而且这些工艺对于卵黄中的抗体并未起到保护措施，喷干后抗体存活基本为零。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种鸡腺病毒卵黄抗体全蛋喷干粉的制备方法；通过该方法得到的全蛋抗体粉剂溶解性好，抗体损失少，抗体活性高，并且成本大大减少。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种鸡腺病毒卵黄抗体全蛋喷干粉的制备方法，步骤如下：

（1）取刚开始产蛋的蛋鸡，为蛋鸡注射腺病毒疫苗，对蛋鸡免疫3次，每次间隔9天，对卵黄中的卵黄抗体进行免疫学检测，腺病毒的卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:15以上时收集鸡蛋；

（2）将收集的鸡蛋进行清洗干净，然后用新洁尔灭进行消毒，之后再清洗喷淋干净，晾干，置于4℃下保存；

（3）将步骤（2）中保存的鸡蛋在无菌条件下打蛋，将整蛋液添加一倍体积水后用搅拌机搅拌均匀；

（4）向整蛋液中添加4‰的酿酒酵母进行除糖，除糖时间为6-10小时，除糖温度为30-35℃；

（5）用pH为3的盐酸溶液活化胃蛋白酶，活化后加水调节pH为4-5，按总蛋液2‰的酶量添加胃蛋白酶进行酶切，酶切时间为2-4h，酶切温度32-37℃；

（6）酶切完成过后，于50℃温浴15-20分钟，在温浴过程中，添加2-8‰的海藻酸钠作为保护剂，1‰吐温80作为乳化剂，5-10％的可溶性淀粉，慢慢搅拌直至温浴时间结束；然后迅速冷却至4℃，设置喷干机进风温度140℃，出风温度70℃，将蛋液进行喷干，收集可得腺病毒全蛋抗体喷干粉。

优选的方案是，所述步骤（4）中除糖时间为8小时。

优选的方案是，所述步骤（4）中除糖温度为32℃。

优选的方案是，所述步骤（5）中酶切时间为3小时。

优选的方案是，所述步骤（5）中酶切温度34℃。

优选的方案是，所述步骤（6）中海藻酸钠的添加量为4‰。

优选的方案是，所述步骤（6）中可溶性淀粉的添加量为8％。

本发明的有益效果体现在：