[发明专利]一种恶性胶质瘤生物标志物的应用

说明书

一种恶性胶质瘤生物标志物的应用，如SEQ ID No:1所示的RHOJ mRNA和如SEQ ID No:2所示的RHOJ蛋白在作为检测靶标在制备诊断、治疗或预后判断恶性胶质瘤试剂盒中的应用。我们发现沉默RHOJ表达显著抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭等恶性表型，RHOJ可作为恶性胶质瘤诊断与预后判断的分子标志物，靶向RHOJ的抗体或小分子抑制剂等治疗策略有望改善恶性胶质瘤治疗。

技术领域

本发明属于生物技术，病理检验和肿瘤学领域，具体涉及一种恶性胶质瘤生物标志物的应用。

背景技术

胶质母细胞瘤(GBM)是中枢神经系统肿瘤中最常见的致命性颅内原发恶性肿瘤，胶质瘤的发病率为5/10万～8/10万，5年病死率在全身肿瘤中仅次于胰腺癌和肺癌，位列第三。其主要特征是丰富血管生成和弥漫性浸润生长，难以病理学上全切除，术后易复发且对于放化疗抗拒。脑胶质瘤可按肿瘤细胞在病理学上的恶性程度分为：Ⅰ～Ⅳ级。低级别胶质瘤(LGG) 主要是WHO II和III级胶质瘤，而高级别胶质瘤(GBM)主要是WHO IV级胶质瘤。随着分子生物学和分子病理诊断的发展，脑胶质瘤的分子分型越来越重要，比如IDH突变，MGMT 启动子甲基化，1p/19q共缺失，TERT启动子突变，EGFR扩增和EGFRvⅢ重排和ATRX突变等。高度血管化和侵袭性生长导致GBM预后差，因此，锁定介导GBM血管生成和侵袭关键分子对于开发有效的分子标志物和治疗靶点具有重要临床意义。

近年研究发现GBM血管生成和内皮屏障完整性与侵袭转移密切相关，涉及多种病理生理状态如细胞骨架及细胞间连接调控，而Rho-GTP酶在其中起着核心作用。Rho-GTP酶是GBM侵袭调控中介导受体起始信号的关键信号元件，可调节细胞形态和肌动蛋白空间结构的动态变化，并刺激通过神经元的狭窄细胞外空间挤压细胞。Rho-GTP酶是小G蛋白的一个家族成员，也是Ras超家族的一部分，它能够调节肌动蛋白，参与细胞骨架重排、囊泡运输和细胞黏附等生理过程。在哺乳动物中目前已经发现20种Rho-GTP酶，被分为8个亚家族。Rho-GTP酶在血管内皮屏障的完整性中起着核心作用，Rho-GTP酶及其调节剂是细胞骨架与细胞间连接的重要调节因子。Rho-GTP酶家族分子对血管内皮屏障的完整性具有双重影响。一方面Rho-GTP酶参与炎性因子诱导的血管内皮稳定性丧失的过程，另一方面参与维持血管内皮屏障稳定性，并且在受损后诱导血管内皮完整性的修复。Rho-GTP酶的双重作用与其亚细胞定位密切相关。

RHOJ是CDC42的同系物，被认为是细胞形态、肌动蛋白细胞骨架、细胞运动、细胞周期的关键调控因子。其高表达于内皮细胞，对于内皮细胞的迁移和血管生成有着重要的调节作用。以往研究显示RHOJ在黑色素瘤中高度表达，并通过其下游的PAK-BAD信号通路调控肿瘤的转移和进展，RHOJ也通过抑制DNA损伤的途径调控黑色素瘤的耐药性。RHOJ 作为一种富含于内皮细胞的小G蛋白，在肿瘤血管生成、肺癌转移和自发乳腺癌模型中发挥了重要作用。RHOJ高表达是胃癌生存结果的独立阴性预后因素，并与胃癌进展和转移有关。然而，RHOJ在恶性胶质瘤中的表达，诊断、治疗和预后判断中的应用目前并无相关报道。

发明内容

解决的技术问题：本发明提供一种恶性胶质瘤生物标志物的应用，明确了RHOJ在调控胶质瘤细胞与肿瘤和正常血管内皮细胞中的作用差异及其调控机制；阐明RHOJ调控胶质瘤增殖、凋亡、侵袭转移和血管生成等恶性表型的作用及其分子机制；如何靶向RHOJ或其结合的关键靶分子并阐明其介导GBM恶性表型的机制及信号通路。制备了用于检测RHOJ 表达的抗体和试剂盒的特异性，基于RHOJ蛋白与晶体结构结合电脑预测的小分子化合物设计合成，以及通过噬菌体展示技术等抗体筛选方法筛选靶向RHOJ的治疗性抗体。

技术方案：如SEQ ID No:1所示的RHOJ mRNA作为检测靶标在制备诊断、治疗或预后判断恶性胶质瘤试剂盒中的应用。