[发明专利]检测血清外泌体CTD-2376I4-1的引物、试剂盒及其在胃癌肝转移诊疗中的应用在审

专利信息
申请号: 202010566970.3 申请日: 2020-06-19
公开(公告)号: CN111690745A 公开(公告)日: 2020-09-22
发明(设计)人: 范钰;何莲;郎亚昆;谷旭宇;周永静;龚丹丹 申请(专利权)人: 镇江市第一人民医院
主分类号: C12Q1/6886 分类号: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
代理公司: 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 代理人: 王玉
地址: 212002*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 检测 血清 外泌体 ctd 2376 i4 引物 试剂盒 及其 胃癌 转移 诊疗 中的 应用
【权利要求书】:

1.检测血清外泌体CTD-2376I4-1的引物,其特征是,所述引物的核苷酸序列如SEQ IDNO:1和SEQ ID NO:2所示。

2.检测血清外泌体CTD-2376I4-1的试剂盒,其特征是,包括权利要求1所述的引物。

3.根据权利要求2所述的检测血清外泌体CTD-2376I4-1的试剂盒,其特征是,还包括血清外泌体的RNA提取试剂、去基因组DNA反应体系、逆转录反应体系、qPCR反应体系。

4.权利要求2或3所述的试剂盒作为胃癌肝转移诊疗试剂的应用。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征是,使用权利要求2或3所述的试剂盒检测血清外泌体中的CTD-2376I4-1。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征是,检测血清外泌体中的CTD-2376I4-1的方法,包括:

提取待检血清中外泌体,从外泌体样本中提取RNA;

从提取的RNA中去除基因组DNA;

对于获得的RNA进行逆转录至cDNA;

对于获得的cDNA通过qPCR法进行检测。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征是,待检血清外泌体样本来自于胃癌患者及正常人。

8.根据权利要求6所述的应用,其特征是,提取待检血清中外泌体的方法为:

全血以3000×g离心15min,移去细胞或细胞碎片;

取上层液体放入离心管,并以250 μl血清加入63 μl ExoQuick试剂,放入4℃ 30min静置;

在4℃下以1500×g离心混合液30min;

吸出所有上清,在4℃下以1500 ×g 离心5min,并吸出全部上清;

放入200 μl 1 x PBS全部溶解沉淀,-20℃保存。

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