[发明专利]β-烟酰胺单核酸的合成方法及其中间体有效
| 申请号： | 202010566477.1 | 申请日： | 2020-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN111647635B | 公开（公告）日： | 2021-09-21 |
| 发明（设计）人： | 袁永红 | 申请（专利权）人： | 理星（天津）生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/30 | 分类号： | C12P19/30 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 李冉 |
| 地址： | 300460 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 烟酰胺单 核酸 合成 方法 及其 中间体 | ||
1.一种制备β-烟酰胺单核酸的方法，其特征在于：所述的方法可以由(a)或(b)的任意一种制得：
(a)：两步酶解法
a1：以烟酰胺核糖和磷脂为底物，在钙离子存在下，经磷脂酶D催化，生成磷脂酰烟酰胺核糖；
a2：以步骤a1生成的磷脂酰烟酰胺核糖为底物，在钙离子存在下，在磷脂酶C的催化下，生成β-烟酰胺单核酸；
(b)：一锅法制备β-烟酰胺单核酸；
所述的一锅法制备β-烟酰胺单核酸可以是(1)或(2)的任意一种：
(1)：以烟酰胺核糖和磷脂为底物，在钙离子存在下，先加入磷脂酶D进行反应，反应结束后，再加入磷脂酶C进行反应，获得β-烟酰胺单核酸；
(2)：以烟酰胺核糖和磷脂为底物，在钙离子存在下，一并加入磷脂酶D和磷脂酶C进行反应，获得β-烟酰胺单核酸。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述的磷脂酰烟酰胺核糖为I：
其中，R1和R2为脂肪酰基。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述的磷脂为天然磷脂或人工合成磷脂。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的磷脂酶C为生物体内普遍存在的磷脂酶C。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的磷脂酶D为生物体内普遍存在的磷脂酶D。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述a1中的烟酰胺核糖和磷脂摩尔用量比为1:10-10:1；
所述钙离子在水中的浓度为0.01-20g/L；
所述磷脂酶D的催化反应温度为20-70℃，反应pH为4.5-7.5。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述磷脂酶D催化反应中还可以加入助剂，包括但不限于正已烷、正庚烷、异丙醇任意一种或二种以上的组合，其中，以重量用量比计算，助剂为正已烷或正庚烷，含量为0-50％，助剂为异丙醇，含量为0-30％。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述a2钙离子在水中的浓度为0.01-20g/L；所述磷脂酶C的催化反应温度为20-70℃，磷脂酶C的反应pH为4.0-7.0。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述磷脂酶C催化反应中还可以加入烷烃和/或短链醇做助剂，其中烷烃选自正已烷、正庚烷中的一种或二种，短链醇选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、戊醇中的一种或二种，以重量用量比计算，助剂为烷烃，含量可为0-80％，助剂为短链醇，含量可为0-30％。
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