[发明专利]一种III型类人胶原蛋白及其编码基因、重组菌与应用有效
| 申请号: | 202010554809.4 | 申请日: | 2020-06-17 |
| 公开(公告)号: | CN111793127B | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
| 发明(设计)人: | 龚劲松;史劲松;李瑛琦;许正宏;钱建瑛;蒋敏 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
| 主分类号: | C07K14/78 | 分类号: | C07K14/78;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;A61K38/39;A61K8/65;A61Q19/00;A61Q19/08;A61P17/18;C12R1/19 |
| 代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 王玉仙 |
| 地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 iii 型类人 胶原 蛋白 及其 编码 基因 重组 应用 | ||
1.一种III型类人胶原蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种权利要求1所述的III型类人胶原蛋白的编码基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种包含权利要求2所述的编码基因的重组表达载体。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体,其特征在于,所述的重组表达载体是以pET-28a为载体。
5.一种表达权利要求1所述的III型类人胶原蛋白的重组菌。
6.根据权利要求5所述的重组菌,其特征在于,所述的重组菌是以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主。
7.一种权利要求5或6所述的重组菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:将包含III型类人胶原蛋白编码基因的重组表达载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,培养、筛选阳性转化子,得到所述的重组菌。
8.一种生产权利要求1所述的III型类人胶原蛋白的方法,其特征在于,包括如下步骤:将表达所述的III型类人胶原蛋白的重组菌以8~12%接种量接种至发酵培养基中发酵培养30~40h,离心去除菌体,得到含有III型类人胶原蛋白的上清液,纯化除盐得到所述的III型类人胶原蛋白。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述的发酵培养基为蛋白胨18~22g/L,酵母粉22~25g/L,KH2PO4 2.0~2.5g/L,K2HPO4·3H2O 16.0~16.5g/L,甘油0.3~0.5%v/v。
10.权利要求1所述的III型类人胶原蛋白在生物医药材料或化妆品中的应用。
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