[发明专利]一种透明质酸环糊精包埋胶原蛋白-花青素pH指示凝胶制备的方法

权利要求书

1.一种透明质酸环糊精包埋胶原蛋白-花青素的pH指示凝胶制备方法，其特征在于，按照以下步骤进行：

一、透明质酸水凝胶制备

取透明质酸，置于4℃条件下溶解在生理盐水中，充分溶胀24h，得到质量分数为0.9％溶液，在4℃条件下用磁力搅拌器以80～100r/min的转速搅拌至完全溶解，将凝胶调pH至5.4～6.2，得透明质酸水凝胶；

二、花青素的制备

用纤维素酶和果胶酶的复合酶辅助超声法提取紫苏叶、芍药花、蛇果果皮中花青素：

1)取紫苏叶、芍药花和蛇果果皮分别在50℃下干燥2～2.5h，磨粉，得混合粉；取混合粉并加入果胶酶、纤维素酶、去离子水放入超声波仪中，在50～55℃、300～350w的条件下超声40～50min进行提取；之后加入95％的乙醇混合振荡10～15min，在4000r/min离心10～15min，取上清液即得花青素溶液；其中，混合粉、果胶酶、纤维素酶、去离子水和95％的乙醇的质量体积比为2～2.5g：0.05～0.06g：0.05～0.06g：40～50mL：60～70mL；

2)将花青素溶液加入旋转蒸发仪中在0.09～0.1MPa、转速为140～160r/min、浓缩温度为40～45℃的条件下浓缩至原体积百分含量为55～60％的浓缩液；将上述浓缩液分装后置于-70℃超低温冰箱内冷冻3～4h，之后放入真空冷冻干燥机内冻干成粉末，即为花青素样品；

三、环糊精包埋胶原蛋白与花青素微粒的制备

壁材：环糊精；

芯材：鲶鱼皮胶原蛋白、鮰鱼皮胶原蛋白、马面鱼皮胶原蛋白、罗非鱼皮胶原蛋白或鲨鱼皮胶原蛋白；

将步骤二的花青素样品与芯材按质量比为1～1.5：1的比例混合；取壁材加水在40℃下用磁力搅拌器搅拌30～40min使壁材充分溶解后加入芯材与花青素样品的混合物进行超声包埋；包埋后放入-70℃的超低温冰箱预冻3～4h，把预冻好的样品放入真空冷冻干燥机中在-70℃下真空冷冻干燥24～30h制成微粒；

其中，壁材：芯材与花青素样品的混合物的质量比为10～12：1；超声包埋的条件为：超声功率300～350w，超声时间30～35min，每隔5min间歇5s；

四、透明质酸混合环糊精包埋胶原蛋白与花青素微粒凝胶制备

将步骤一制得的透明质酸水凝胶与步骤三制得的微粒按体积质量比为35～40mL：1g的比例混合并搅拌均匀，制成所述的透明质酸环糊精包埋胶原蛋白-花青素的pH指示凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种透明质酸环糊精包埋胶原蛋白-花青素的pH指示凝胶制备方法，其特征在于步骤一所述的凝胶调pH是用0.1mol/L盐酸调节的。

3.根据权利要求1所述的一种透明质酸环糊精包埋胶原蛋白-花青素的pH指示凝胶制备方法，其特征在于在步骤一调节pH后，将得到的透明质酸水凝胶在4℃、0.098MPa下抽真空30min，除去搅拌过程中产生的气泡。

4.根据权利要求1所述的一种透明质酸环糊精包埋胶原蛋白-花青素的pH指示凝胶制备方法，其特征在于步骤一中透明质酸水凝胶制备：

取透明质酸，置于4℃条件下溶解在生理盐水中，充分溶胀24h，得到质量分数为0.9％溶液，在4℃条件下用磁力搅拌器以80～100r/min的转速搅拌至完全溶解，将凝胶调pH至5.8～6.0，得透明质酸水凝胶。

5.根据权利要求1所述的一种透明质酸环糊精包埋胶原蛋白-花青素的pH指示凝胶制备方法，其特征在于步骤二中的第1)步骤：取紫苏叶、芍药花和蛇果果皮分别在50℃下干燥2～2.5h，磨粉，得混合粉；取混合粉并加入果胶酶、纤维素酶、去离子水放入超声波仪中，在51～55℃、320～350w的条件下超声40～50min进行提取；之后加入95％的乙醇混合振荡10～15min，在4000r/min离心10～15min，取上清液即得花青素溶液；其中，混合粉、果胶酶、纤维素酶、去离子水和95％的乙醇的质量体积比为2～2.2g：0.05～0.06g：0.05～0.06g：40～50mL：60～70mL。