[发明专利]一种与肺纤维化辅助诊断相关的外周血circRNA标志物及其应用

说明书

本发明提供一种与肺纤维化辅助诊断相关的外周血circRNA标志物及其应用，所述外周血circRNA标志物为hsa‑circ‑0003638与hsa‑circ‑0058493的组合。与肺纤维化相关的外周血circRNA标志物可用于制备肺纤维化辅助诊断试剂盒。本发明通过研究外周血circRNA在辅助矽肺和IPF相关肺纤维化诊断的应用前景，阐述差异表达的circRNA对肺纤维化发生的影响，揭示其筛查和诊断价值。因此，本发明获得了肺纤维化辅助诊断相关外周血circRNAs表达数据和标志物；通过外周血circRNAs生物标志物和辅助诊断试剂盒的研制和应用，可使得鉴定肺纤维化高风险个体变得可行，对预防和控制矽肺和IPF的发生发展具有重要意义。

技术领域

本发明属于医学及分子生物学领域，具体涉及一种与肺纤维化辅助诊断相关的外周血circRNA标志物及其应用。

背景技术

肺纤维化是以成纤维细胞增殖以及大量细胞外间质聚集并伴有炎症损伤、组织结构破坏为特征的肺部疾病的终末期改变。值得注意的是，肺纤维化并不是一种独立的疾病，而是由物理、化学因素或其他致病因素导致肺间质结构被破坏后引起的肺部组织异常修复。绝大多数的肺纤维化病人病因未明，因此这组疾病也被称为特发性间质性肺炎(Idiopathic Interstitial Pneumonia，IIP)，其中特发性肺纤维化(IdiopathicPulmonary Fibrosis，IPF)是IIP最常见的疾病类型。而病因可查的肺纤维化被称为继发性肺纤维化，常见病因有：职业性粉尘吸入相关，如矽肺等；吸入过敏原相关，如过敏性肺炎等。

矽肺病是一种常见的职业性肺病，主要特征是肺部弥漫性纤维化。根据《2017年全球疾病负担研究》，从1990年到2017年，因矽肺病所致的伤残损失健康生命年增长了45.4％，矽肺病病例数在二十年间也增长了58.25％。显而易见，矽肺病已经给人类的个体健康带来沉重负担，是我国严重的公共卫生问题之一。矽肺病的病因较为明确，是由于长期暴露于游离二氧化硅粉尘所引起的，但是其发病机制尚不明确。更严重的是，矽肺是一种进行性疾病，即使停止接触游离二氧化硅粉尘，肺部所受到的纤维化损害仍会继续发展，由此可见，矽肺纤维化是一种不可逆的且无法治愈的疾病。

IPF是一种慢性、进行性的、可致命的疾病，以肺内瘢痕组织形成、进行性呼吸困难和患者诊断后寿命显著缩短为典型特征，多发于老年人群。研究显示，全球有数百万人遭受IPF的影响。一项回顾性研究分析了21个国家的IPF患病率，发现世界各国的IPF患病率呈现上升趋势，而且随着人口老龄化和聚集性空气污染的增加，使得IPF的患病率进一步提升。我国IPF发病率在过去的二十年里也呈现逐步增长的趋势。由于IPF早期症状不明显，人们对于IPF的认知度低，使得患者确诊时间晚，确诊后中位生存期仅2-3年，五年生存率低于30％。因此，早期诊断或筛查对于预防和治疗IPF至关重要。

值得一提的是，无论是IPF还是矽肺，其肺部纤维化发生发展的调控机制尚不明确，病人一经确诊，肺部纤维化病变仍会持续进展，且无特效药物能够延缓或逆转肺部纤维化进程。因此，明确肺纤维化的发病机制，并探寻生物标志物作为干预肺纤维化进程的靶点，对控制肺纤维化进展、提高患者生活质量及延长生存时间具有重要公共卫生意义和临床应用价值。

非编码RNA广泛存在于外周血中，具有含量丰富、性质稳定、易于实时精确定量检测等特质，更重要的是基于外周血的检测具有侵入性更小、更易获得的优势，因此十分具有临床标志物应用价值。环状RNA(circular RNA，circRNA)是一类重要的非编码RNA，同时由于circRNA具有闭合环状结构，核酸酶对circRNA并不起作用，这使得circRNA在细胞内具有很好的稳定性，被认为是比传统的微小RNA(microRNA，miRNA)等线性RNA更好的生物标记。进一步的实验证据表明，circRNA广泛参与多种纤维化疾病发生发展的调控，包括肾纤维化、心肌纤维化等。综上所述，结合其稳定的结构，circRNA被认定可能是纤维化疾病诊断和预后的新型理想生物标志物。