[发明专利]龙血竭药材基原的物种鉴定方法以及试剂盒

权利要求书

1.一种龙血竭药材基原的物种鉴定方法，其特征在于，其包括：

将待鉴定序列与参考序列一起构建系统进化树；

其中，所述参考序列包括来自多种龙血树属植物的比对序列，每种龙血树属植物的比对序列由该物种植物的psbK-psbI基因序列和trnP-psaJ基因序列拼接而成；所述待鉴定序列由龙血竭药材基原待测样品的psbK-psbI基因序列和trnP-psaJ基因序列拼接而成；所述多种龙血树属植物选自岩棕、剑叶龙血树、海南龙血树、矮龙血树、长花龙血树、河口龙血树以及细枝龙血树中的至少2种；岩棕的比对序列为SEQ ID NO.1；

剑叶龙血树的比对序列选自SEQ ID NO.4-6中的至少一种；

海南龙血树的比对序列为SEQ ID NO.7；

河口龙血树的比对序列为SEQ ID NO.10；

矮龙血树的比对序列为SEQ ID NO.12；

细枝龙血树的比对序列为SEQ ID NO.15；

长花龙血树的比对序列选自SEQ ID NO.18和SEQ ID NO.19中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的龙血竭药材基原的物种鉴定方法，其特征在于，所述多种龙血树属植物选自岩棕、剑叶龙血树、海南龙血树、矮龙血树、长花龙血树、河口龙血树以及细枝龙血树中的7种。

3.根据权利要求1-2任一项所述的龙血竭药材基原的物种鉴定方法，其特征在于，所述参考序列还包括来自非龙血树属植物的对照序列，所述对照序列由所述非龙血树属植物的psbK-psbI基因序列和trnP-psaJ基因序列拼接而成。

4.根据权利要求3所述的龙血竭药材基原的物种鉴定方法，其特征在于，所述非龙血树属植物选自柔软丝兰。

5.根据权利要求3所述的龙血竭药材基原的物种鉴定方法，其特征在于，所述对照序列如SEQ ID NO.21所示。

6.权利要求1-2任一项所述的龙血竭药材基原的物种鉴定方法，其特征在于，所述龙血竭药材基原待测样品的psbK-psbI基因序列和trnP-psaJ基因序列通过PCR扩增结合测序技术确定。

7.权利要求6所述的龙血竭药材基原的物种鉴定方法，其特征在于，通过PCR扩增psbK-psbI基因序列时所用的引物序列如SEQ ID NO.22-23所示。

8.权利要求6所述的龙血竭药材基原的物种鉴定方法，其特征在于，通过PCR扩增trnP-psaJ基因序列时所用的引物序列如SEQ ID NO.24-25所示。

9.根据权利要求1-2任一项所述的龙血竭药材基原的物种鉴定方法，其特征在于，采用最大似然法、邻接法、最大简约法、最小进化法、贝叶斯推断法或UPGMA法构建系统进化树。

10.一种用于鉴定龙血竭药材基原的物种的试剂盒，其特征在于，其包括用于获取龙血竭药材基原待测样品的psbK-psbI基因序列和trnP-psaJ基因序列的试剂；所述试剂包括用于PCR扩增psbK-psbI基因序列的第一引物对，以及用于PCR扩增trnP-psaJ基因序列的第二引物对；

所述第一引物对序列如SEQ ID NO.22-23所示；

所述第二引物对序列如SEQ ID NO.24-25所示。