[发明专利]一种即用型微量成分检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种即用型微量成分检测试剂盒的制备方法，该试剂盒包括即用型检测微孔板和标准品，其特征在于，制备方法包括以下步骤：

（1）将微量成分特定测试培养基与塑形填充剂混合，装入载体容器后冻干，获得微量成分测试培养基固定层；

（2）将抗氧化阻隔液与塑形填充剂混合，装入载体容器以覆盖在已冻干的微量成分测试培养基固定层上，冻干获得位于微量成分测试培养基固定层上的抗氧化阻隔层；

（3）将已活化的微量成分测试菌种分散于凝胶保护剂中，取菌悬液黏附于载体容器中并固定化干燥，即得即用型微量成分检测微孔板；

（4）制备微量成分标准品；

步骤（3）所述固定化干燥为：预冻阶段为温度控制在-80℃~-48℃，保持0.5~3h；一次升华干燥阶段为温度控制在-60℃~-35℃，将真空度降至0.35~0.55mbar，达到最终真空度时间为8~12h；二次升华干燥阶段为温度控制在0℃，真空度控制在0.35~0.55 mbar，达到最终温度时间为10~16h；解析干燥阶段为温度控制在24℃，真空度控制在0.010~0.020mbar，达到最终温度时间为 8~12h；

其中，

微量成分为泛酸时，所述微量成分测试菌种为植物乳酸杆菌；所述塑形填充剂组分包括：2~8wt%右旋糖酐5000~7500、1~10wt%聚乙二醇4000~8000及0.5~1.5wt%α-环状糊精，余量为水；所述抗氧化阻隔液组分包括：2~12wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、0.1~2wt%维生素E、2~4wt%抗坏血酸钠及0.005~0.05wt%谷胱甘肽，余量为水；所述凝胶保护剂组分包括：2~6wt%甘露醇、0.1~0.8M氯化镁、0.2~2wt%牛奶酪蛋白及0.02~0.2wt%瓜尔胶/卡拉胶/黄原胶，余量为水；或，

微量成分为烟酸和烟酰胺时，所述微量成分测试菌种为发酵乳酸杆菌；所述塑形填充剂组分包括：2~8wt%右旋糖酐5000~7500、2~8wt%聚乙二醇4000~8000及1~4wt%羟甲基纤维素，余量为水；所述抗氧化阻隔液组分包括：2~8wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、2~4wt%抗坏血酸钠、0.01~0.06wt%维生素D及0.005~0.01wt%谷胱甘肽，余量为水；所述凝胶保护剂组分包括： 0.5~1M氯化镁、0.2~2wt%牛奶酪蛋白、0.5~4wt%可溶性淀粉及0.02~0.2wt%瓜尔胶/卡拉胶/黄原胶，余量为水；或，

微量成分为维生素B6时，所述微量成分测试菌种为卡尔斯伯酵母菌；所述塑形填充剂组分包括： 2~10wt%聚乙二醇4000~8000、3~5wt%羟甲基纤维素及1~1.5wt%α-环状糊精，余量为水；所述抗氧化阻隔液组分包括：2~12wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、0.1~3wt%维生素E、0.05~0.15wt%硫代硫酸钠及0.01~0.05wt%谷胱甘肽，余量为水；所述凝胶保护剂组分包括：0.5~1M氯化镁、2~5wt%可溶性淀粉及0.02~0.2wt%瓜尔胶/卡拉胶/黄原胶，余量为水；或，

微量成分为维生素B1时，所述微量成分测试菌种为鼠李糖乳酸杆菌；所述塑形填充剂组分包括：1~8wt%右旋糖酐5000~7500、1~8wt%聚乙二醇4000~8000及0.2~1wt%α-环状糊精，余量为水；所述抗氧化阻隔液组分包括：1~8wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、2~4wt%抗坏血酸钠及0.01~0.05wt%谷胱甘肽，余量为水；所述凝胶保护剂组分包括：2~6wt%甘露醇、0.5~1M氯化镁0.02~0.2wt%瓜尔胶/卡拉胶/黄原胶，余量为水；或，

微量成分为维生素B2时，所述微量成分测试菌种为葡萄汁酵母菌；所述塑形填充剂组分包括：1~8wt%右旋糖酐5000~7500、1~8wt%聚乙二醇4000~8000及0.2~1.5wt%α-环状糊精，余量为水；所述抗氧化阻隔液组分包括：1~8wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、2~4wt%抗坏血酸钠及0.005~0.02wt%谷胱甘肽，余量为水；所述凝胶保护剂组分包括：2~6wt%甘露醇、0.1~0.8M氯化镁及0.02~0.2wt%瓜尔胶/卡拉胶/黄原胶，余量为水；或，

微量成分为肌醇时，所述微量成分测试菌种为柠檬克勒克酵母菌；所述塑形填充剂组分包括：2~10wt%右旋糖酐5000~7500、2~10wt%聚乙二醇4000~8000及1~3wt%羟甲基纤维素，余量为水；所述抗氧化阻隔液组分包括：1~8wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、2~4wt%抗坏血酸钠及0.01~0.1wt%维生素D，余量为水；所述凝胶保护剂组分包括：2~6wt%甘露醇、0.1~1M氯化镁及0.02~0.2wt%瓜尔胶/卡拉胶/黄原胶，余量为水。