[发明专利]一种基于Trinder反应的检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种基于Trinder反应的检测试剂盒及其应用，属于临床化学检测技术领域，由R1试剂和R2试剂组成，R1和R2试剂中包含催化待测物生成过氧化氢的酶，R1试剂中还含有缓冲液、防腐剂、过氧化物酶，R2试剂中含有缓冲液、防腐剂、过氧化物和色原底物，所述R1试剂中过氧化物酶的浓度为100～150KU/L，且R1试剂中还含有浓度为0.5～1g/L的4‑氨基安替比林。其中R1试剂中的过氧化物酶和4‑氨基安替比林可在Trinder反应前，去除待测物中可参与Trinder反应的临床药物，使得测定结果更加准确。本发明不需要在反应体系中额外加入其它物质，不会引入其它杂质；该方法简单高效，可广泛用于多种临床化学检测，避免临床药物的干扰，增强检测结果的准确性，同时还提高了试剂盒的功能灵敏度。

技术领域

本发明属于临床化学检测技术领域，具体涉及一种基于Trinder反应的检测试剂盒及其应用。

背景技术

Trinder反应又称“偶联终点比色法”，其原理为被测物质通过酶作用产生的过氧化氢(H₂O₂)在4-氨基安替比林(4-AAP)、过氧化物酶(POD)的存在下，可生成红色醌亚胺化合物，通过测定反应前后的吸光度差值，即可计算得到待测物的浓度。临床生化许多检测项目都应用了Trinder反应，如葡萄糖、甘油三脂、胆固醇、尿酸、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、游离脂肪酸等。如中国专利CN106191213B公开了一种游离脂肪酸测定试剂盒及其制备方法，其反应原理是人血清中游离脂肪酸和辅酶A在乙酰辅酶A合成酶的作用下反应生成脂酰辅酶A，脂酰辅酶A在乙酰辅酶A氧化酶的作用下生成H₂O₂，随后通过Trinder反应在过氧化物酶(POD)的作用下生成有色物质以测定游离脂肪酸含量。

然而随着医学的迅猛发展，越来越多的药物及检验项目运用于临床，有研究表明，当患者服用1种药物时，受药物干扰的实验所占百分比为7％，服用2种药物时，占16.7％，服用三种或四种药物时，百分比为66.7％，服用5种药物时，受干扰的试验占比达100％。药物对检测结果的影响，不仅导致对检测结果的错误解释、误诊，而且增加了一些不必要的检查，所以解决检测中的药物干扰问题显得尤为重要。临床上常见药物如：羟苯磺酸钙(用于治疗微血管疾病等)、酚磺乙胺(止血药物)、甲基多巴(抗高血压药物)、左旋多巴(用于治疗帕金森综合征)、多巴胺(神经传导物质)等，由于具有强还原性或与Trinder反应中的色原底物结构类似，因此会在Trinder反应时消耗过氧化氢，导致待测物的测量值偏低。并且这些药物结构稳定、不易被破坏或降解，因此会对基于Trinder反应的临床化学检测产生干扰，影响测定结果。

发明内容

本发明针对现有技术存在的缺陷，提供了一种基于Trinder反应的检测试剂盒，该试剂盒通过在R1试剂中提前加入过氧化物酶和4-氨基安替比林，去除待测物中参与Trinder反应的临床药物，从而避免了化学检测过程中多种临床药物对Trinder反应检测的干扰，将该试剂盒用于临床化学检测，可使得测定结果更准确、抗干扰能力更强。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种基于Trinder反应的检测试剂盒，由R1试剂和R2试剂组成，R1和R2试剂中包含催化待测物生成过氧化氢的酶，R1试剂中还含有缓冲液、防腐剂、过氧化物酶，R2试剂中含有缓冲液、防腐剂、过氧化物和色原底物，其中所述R1试剂中过氧化物酶的浓度为100～150KU/L，同时R1试剂中还含有浓度为0.5～1g/L的4-氨基安替比林；

所述检测试剂盒可提高抗临床药物干扰的能力，所述临床药物包括：羟苯磺酸钙、酚磺乙胺、甲基多巴、左旋多巴、多巴胺中的一种或多种。

本发明的技术方案还提供了一种提高Trinder反应检测抗干扰能力的方法，包括以下步骤：