[发明专利]一种基于纳米酶检测葡萄糖-6-磷酸含量的方法

权利要求书

1.一种测定葡萄糖-6-磷酸含量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）将不同浓度的葡萄糖-6-磷酸分别与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、氧化型辅酶混合，孵育；然后分别加入对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸羟化酶和缓冲液，继续进行孵育，获得相应混合溶液；

（2）孵育结束后，分别向混合溶液中加入钛酸锶、特征显色底物和缓冲溶液，在可见光照射下，使用酶标仪进行光谱扫描，获得不同浓度下的吸光度的增量；所述的吸光度增量为不同葡萄糖-6-磷酸浓度相对葡萄糖-6-磷酸浓度为0时的吸光度增量；

（3）利用葡萄糖-6-磷酸的浓度与吸光度的增量构建线性关系，得到线性测定模型；

所述步骤（1）是将0.05 mM的氧化型辅酶，14 U/mL 的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，不同浓度的葡萄糖-6-磷酸混合，在30~40 ℃下孵育10-15 min；

步骤（2）中钛酸锶的制备方法包括如下过程：

将含钛化合物溶解在乙二醇中，获得澄清溶液，然后向其中滴入锶盐溶液，最后加入NaOH溶液，混匀形成混合体系；将混合体系转移至高压釜中进行反应；反应结束后，洗涤、干燥，得到白色粉末钛酸锶产物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述特征显色底物为3,3’, 5,5’-四甲基联苯胺和/或2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述氧化型辅酶选自氧化型辅酶Ⅰ和/或氧化型辅酶Ⅱ。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：按照步骤（1）和步骤（2），对待测样品进行孵育处理，测得相应的吸光度差值；然后通过步骤（3）的线性测定模型，计算得到待测样品中葡萄糖-6-磷酸的浓度。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，含钛化合物与锶盐的摩尔比为1：（1-5）。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的含钛化合物选自钛酸四丁酯、四氯化钛；所述的锶盐选自氯化锶、硝酸锶。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述锶盐溶液的浓度为0.1-0.5 mol/L。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应的温度为150-200 ℃；反应的时间为20-24 h。