[发明专利]一种短链脂肪酸的检测方法

说明书

本发明提供一种短链脂肪酸的检测方法，短链脂肪酸的检测方法包括：步骤S1:配制不同浓度的短链脂肪酸标准品混合液，并往所述标准品混合液中加入内标，采用气相色谱‑质谱联用仪测试短链脂肪酸标准品以及内标的峰面积，求出线性回归方程；步骤S2:往测试样本中加入酸液及含内标的提取液进行提取，得到分离液，利用气相色谱‑质谱联用仪得到短链脂肪酸的峰面积以及内标的峰面积；步骤S3:计算测试样品的短链脂肪酸含量；其中，所述提取液为甲基叔丁基醚。本发明的有益效果在于：采取甲基叔丁基醚在低温下进行提取，提取方法不仅适用于多种生物样品，且简单稳定；多反应检测模式建库，排除假阳性干扰，更为准确，且灵敏度高；检测时间短。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种短链脂肪酸的检测方法。

背景技术

短链脂肪酸(short-chainfattyacids，SCFAs)，也称挥发性脂肪酸(Volatilefattyacids，VFAs)，根据碳链中碳原子的多少，把碳原子数为1-6的有机脂肪酸称为短链脂肪酸，主要包括乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸，已酸等，主要由厌氧微生物发酵难消化的碳水化合物而产生，SCFAs已被证明参与多种生命活动，因此对短链脂肪酸的检测及控制对于医学、食品等领域的研究具有很大的指导作用。

现有关于短链脂肪酸的分析检测技术中前处理方法的不稳定，会影响短链脂肪酸的分离效果，进而会影响检测结果，因此研究稳定的前处理方法增加后续检测的精确度很有必要。

发明内容

为解决现有技术中短链脂肪酸前处理不稳定的技术缺陷，本发明提供一种短链脂肪酸的检测方法。

具体技术方案如下：

一种短链脂肪酸的检测方法，其不同之处在于，所述短链脂肪酸的检测方法包括：

步骤S1:配制不同浓度的短链脂肪酸标准品混合液，并往所述标准品混合液中加入内标，采用气相色谱-质谱联用仪测试，求出线性回归方程，所述线性回归方程是关于所测短链脂肪酸与内标物质的峰面积的比值、所测物质与内标物质浓度的比值的二元一次方程；

步骤S2:往测试样本中加入酸液及含内标的提取液进行提取，得到分离液，利用气相色谱-质谱联用仪测试所述分离液；

步骤S3:将步骤S2测试结果代入所述线性回归方程，计算测试样品的短链脂肪酸含量；

其中，所述提取液为甲基叔丁基醚；

所述短链脂肪酸为乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸及己酸。

进一步，所述步骤S2中，提取过程为：测试样本加入酸液及提取液，经涡旋、超声及离心处理进行分离后，取分离液。

进一步，所述步骤S2中，提取过程包括：测试样本加入酸液及提取液后，在4℃以下处理。

进一步，短链脂肪酸的离子对和碰撞能量如下表所示：

进一步，所述气相色谱-质谱测试的参数设置如下表所示：

进一步，所述内标为2-甲基戊酸。

进一步，所述酸液为体积百分比为0.5％的磷酸或体积百分比为36％的磷酸。

进一步，测试样品为血清样品，所述酸液为体积百分比为36％的磷酸。

进一步，测试样品为饲料样品或粪便样品，所述酸液为体积百分比为 0.5％的磷酸。