[发明专利]一种人工泪液及其制备方法

权利要求书

1.一种人工泪液，其特征在于，包含0.0005-0.005wt％的人脐带间充质干细胞外泌体。

2.根据权利要求1所述的人工泪液，其特征在于，所述人工泪液还包括1-4wt％的溶菌酶、0.01-1wt％的黄原胶、0.1-4wt％的水溶性羟丙基壳聚糖及电解质。

3.根据权利要求2所述的人工泪液，其特征在于，所述电解质包括氯化钠、氯化钾和/或氯化钙。

4.根据权利要求3所述的人工泪液，其特征在于，所述氯化钠的量为所述人工泪液的0.8-1wt％，所述氯化钾的量为所述人工泪液的0.01-0.02wt％，所述氯化钙的量为所述人工泪液的0.035-0.055wt％。

5.根据权利要求1所述的人工泪液，其特征在于，所述人脐带间充质干细胞外泌体的制备方法，包括以下步骤：

(1)培养足量的人脐带间充质干细胞，在提取干细胞外泌体前48h，PBS清洗细胞，更换无血清培养基，继续培养48h；

(2)收集无血清培养基，300×g离心10min，取上清；

(3)2000×g离心10min，取上清；

(4)10000×g离心30min，取上清；

(5)100000×g离心70min，取沉淀；

(6)PBS重悬沉淀，100000×g离心70min，收集沉淀,即得所述人脐带间充质干细胞外泌体。

6.根据权利要求5所述的人工泪液，其特征在于，所述步骤(1)具体为：

在普通血清培养基上培养足够量的人脐带间充质干细胞，培养的温度为36～38℃，培养时环境CO₂的体积浓度为4％～6％；在提取干细胞外泌体前48h，用PBS清洗细胞，更换无血清培养基，继续培养48h。

7.一种权利要求1-6任一项所述的人工泪液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将黄原胶和水溶性羟丙基壳聚糖置于注射用水中充分浸泡溶胀，直至完全溶解；

(2)将电解质直接溶解于注射用水中；

(3)将溶菌酶直接溶解于注射用水中；

(4)将以上步骤所制备的液体混合后充分搅拌均匀得复合液体；

(5)将人脐带间充质干细胞外泌体加入到所述复合液体中；

(6)将复合液体加注射用水至足量，充分搅拌均匀后再用磷酸钠盐缓冲剂调节PH至6-7，得到人工泪液中间品；

(7)将所得的人工泪液中间品经抽滤，精滤，通过无菌灌装得成品。

8.一种权利要求1-6任一项所述的人工泪液在制备治疗或预防眼部不适症状的药物中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述眼部不适症状包括干眼症引起的眼部不适症状和自身免疫性葡萄膜炎、结膜炎、角膜炎和角膜溃疡引起的眼部不适症状。