[发明专利]细胞培养板，其制备方法和检测物质的方法

权利要求书

1.一种细胞培养板，其包括一个或多个细胞培养孔，所述细胞培养孔包括用于将孔分隔成至少两个隔室的至少一个阻隔件，其中所述阻隔件包含纳米原纤纤维素水凝胶，例如其中所述阻隔件的壁厚在0.5–2mm的范围内。

2.如权利要求1所述的细胞培养板，其中，所述纳米原纤纤维素水凝胶包含0.8–2.5％(w/w)的纳米原纤纤维素，优选1.0–2.1％(w/w)。

3.如权利要求1或2所述的细胞培养板，其包含位于细胞培养板和纳米原纤纤维素水凝胶之间的粘合剂，例如基于胶原的粘合剂，基于纤维蛋白原的粘合剂，基于明胶的粘合剂或基于赖氨酸的粘合剂，例如聚-D-赖氨酸或明胶。

4.如前述权利要求中任一项所述的细胞培养板，其中，所述至少一个阻隔件包围所述细胞培养孔上的至少一个区域，例如，所述阻隔件为圆形的形式。

5.如前述权利要求中任一项所述的细胞培养板，其中，所述纳米原纤纤维素当分散在水中时提供在1000–100000Pa·s范围内、例如在5000-50000Pa·s范围内的零剪切粘度，和在1–50Pa范围内、例如在3–15Pa范围内的屈服应力，这些数值是通过使用旋转流变仪在22℃±1℃下，稠度为0.5重量％(w/w)的条件下在水性介质中确定的，以及/或者其中所述纳米原纤纤维素的平均原纤直径为200nm或更小，例如在1–200nm的范围内。

6.如前述权利要求中任一项所述的细胞培养板，其中，所述纳米原纤纤维素选自未改性的纳米原纤纤维素，阴离子改性的纳米原纤纤维素和氧化的纳米原纤纤维素，例如TEMPO氧化的纳米原纤纤维素。

7.如前述权利要求中任一项所述的细胞培养板，其中，至少一个隔室包含与阻隔件相比具有更低浓度的凝胶，例如与阻隔件相比具有更低浓度的纳米原纤纤维素的纳米原纤纤维素水凝胶，例如0.7％(w/w)或更低的浓度，例如0.2-0.7％(w/w)的浓度。

8.如前述权利要求中任一项所述的细胞培养板，其中，孔在一个隔室中包含一种类型的细胞，并且任选地在至少一个其他隔室中包含相同种类和/或其他类型的细胞，例如选自以下的细胞：肝细胞，例如肝实质细胞，例如肝细胞癌细胞，内皮细胞，脂肪细胞，心肌细胞，肾细胞，免疫细胞，例如巨噬细胞和单核细胞，或神经细胞，例如神经母细胞瘤细胞，和干细胞。

9.一种制备如前述权利要求中任一项所述的细胞培养板的方法，所述方法包括：

-提供包括一个或多个细胞培养孔的细胞培养板，

-提供包含纳米原纤纤维素，优选包含0.8-2.5％(w/w)，更优选1.0–2.1％(w/w)纳米原纤纤维素的水性分散体，

-在至少一个细胞培养孔中由纳米原纤纤维素形成至少一个阻隔件，以将孔分隔为至少两个隔室。

10.如权利要求9所述的方法，其中，形成至少一个阻隔件包括通过增材制造来制备阻隔件，例如通过使用环喷嘴来制备阻隔件。

11.如权利要求9或10所述的方法，其包括在提供至少一个阻隔件之前，用粘合剂涂覆一个或多个细胞培养孔，所述提供至少一个阻隔件包括形成或施加至少一个阻隔件，所述粘合剂包括例如基于胶原的粘合剂，基于纤维蛋白原的粘合剂，基于明胶的粘合剂或基于赖氨酸的粘合剂，例如聚-D-赖氨酸或明胶。

12.一种检测物质的方法，所述方法包括：

-提供在第一隔室中包含第一细胞的如权利要求1-8中任一项所述的细胞培养板，和

-从另一隔室中检测至少一种物质。