[发明专利]检测芍药甘草汤对应实物的液相色谱方法、标准指纹图谱和应用

说明书

本发明涉及检测芍药甘草汤对应实物的液相色谱方法、标准指纹图谱和应用。所述方法采用配备有紫外检测器的高效液相色谱仪进行检测，色谱条件如下：流动相：乙腈(A)‑0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱0‑1min 14‑17.5％A,1‑5min 17.5‑19％A,5‑6min 19‑20％A,6‑7min 20％A,7‑8min 20‑20.5％A,8‑12min 20.5‑23％A,12‑30min 23‑36％A,30‑32min 36％A,32‑45min 36‑43％A；色谱柱：Venusil XBP C18 4.6*150mm,3μm；检测波长230‑240nm；流速：1.0ml/min；柱温20‑30℃。所得芍药甘草汤对应实物标准指纹图谱可以用于进行芍药甘草汤对应实物的质量控制。

技术领域

本发明属于中药分析领域，涉及一种检测芍药甘草汤对应实物的液相色谱方法、包含该方法的建立标准指纹图谱的方法、芍药甘草汤对应实物标准指纹图谱和应用。

背景技术

芍药甘草汤对应实物按照处方由中药饮片加水煎煮后冻干制得，中药饮片为白芍、炙甘草。

《中国药典》是我国药品质量标准的法典，检验、判定药品合格与否的法定依据。现行版本是2015版，芍药甘草汤中2味中药饮片均被收载，药典中对于处方饮片的主要化学成分控制对于研究芍药甘草汤对应实物关键质量属性有重要意义。白芍、炙甘草的主要含量测定指标及其限度要求见表1。

表1单味饮片药典含量测定

近年，随着监管部门对药品质控提出更高要求，要求生产厂家严格控制产品批间稳定性，因此采用有效的质量控制方法尤为重要。

中药指纹图谱技术因可全面标示中药主要化学成分的特性及其比例的特点，越来越多用于中药的质量控制。色谱法是分析化学领域中发展较快，应用较广泛的分析方法之一，也是中药指纹图谱最基本的技术。常用的色谱法有薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法，其中高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)具有应用范围广、分析速度快、灵敏度高等优点，是目前研究中药指纹图谱应用最广泛的方法。蒸发光散射检测器(Evaporative Light Scattering Detector，ELSD)是一种通用型质量检测器，可弥补在HPLC中应用最广的紫外检测器对检测物质必须具有吸收紫外光的生色团的要求。ELSD作为一种浓度型检测器，在无紫外或紫外末端吸收的未知化合物的纯度检测过程中，显示出极大的优越性。

芍药甘草汤成方的主要成分包括芍药苷、甘草苷和甘草酸。目前还没有关于检测芍药甘草汤对应实物的液相色谱方法，建立芍药甘草汤标准指纹图谱的方法以及采用其进行质量控制的研究。

发明内容

为了更全面有效控制芍药甘草汤对应实物的质量，本发明人经仔细研究采用HPLC法并对流动相、检测波长、色谱柱、梯度条件、流速和进样量等条件进行研究，得到了一种检测芍药甘草汤对应实物的液相色谱方法，同时通过对提取溶液、提取方式、超声时间、溶剂量等进行研究得到了制备供试品溶液的方法，并由此得到了建立芍药甘草汤对应实物标准指纹图谱的方法和芍药甘草汤对应实物标准指纹图谱，其可以用于进行芍药甘草汤对应实物的质量控制，由此完成了本发明。

本发明一方面提供了一种检测芍药甘草汤对应实物的液相色谱方法，所述方法采用配备有紫外检测器的高效液相色谱仪进行检测，色谱条件如下：

色谱柱：Venusil XBP C18 4.6*150mm,3μm；

流动相：乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，

梯度洗脱：按下表中的规定进行

流速：1.0ml/min；

柱温：20-30℃，优选25℃；