[发明专利]一种TOB1基因敲除单克隆细胞系的构建方法和应用有效
| 申请号： | 202010522276.1 | 申请日： | 2020-06-10 |
| 公开（公告）号： | CN111621526B | 公开（公告）日： | 2021-06-18 |
| 发明（设计）人： | 郑海学;李丹;赵要风;刘恬然;彭高闯;杨帆;田宏;冯涛;齐晓兰;杜旭光;张克山;郭建宏;吴森 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/85;C12N5/10;A01K67/027;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人： | 韩慧颖 |
| 地址： | 730046 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 tob1 基因 单克隆 细胞系 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种
（1）制备靶向
（2）将步骤（1）所述的双链片段与Bbs I酶切后的pCRISPR-s4载体连接，获得基因打靶载体；
（3）将步骤（2）所述的基因打靶载体与Cas9表达质粒pCRISPR-s10和piggyBac转座酶表达质粒pPbase共转染宿主细胞，获得
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞来源于牛科（
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