[发明专利]一种用于水环境DNA富集的滤膜组件、收集器及应用方法

权利要求书

1.一种用于水环境DNA富集的滤膜组件，其特征在于：所述滤膜组件包括：

至少三层由上到下依次层叠设置的上层、中层、下层滤膜（100），按照由上到下的次序，各层滤膜（100）的滤孔孔径呈线性减小或阶梯式减小，所述上层滤膜（100）的滤孔孔径为20~100 μm；中层滤膜（100）的滤孔孔径为5~20 μm；下层滤膜（100）的滤孔孔径为0.2~1 μm；上下相邻的两层滤膜（100）之间保持一定空隙；

所述上下相邻的两层滤膜（100）之间的空隙内填充有若干数量的微球（200），所述微球（200）的填充体积为15~30%，所述微球（200）包括二氧化硅或氧化锆微珠，所述微球（200）的粒径为2~5mm，所述微球（200）可在空隙内自由移动。

2.根据权利要求1所述的用于水环境DNA富集的滤膜组件，其特征在于：所述上下相邻的两层滤膜（100）之间的滤孔呈交错状设置。

3.根据权利要求2所述的用于水环境DNA富集的滤膜组件，其特征在于：所述上下相邻两层滤膜（100）之间的边缘通过黏胶剂进行黏合，形成滤膜黏合边缘（300）。

4.根据权利要求3所述的用于水环境DNA富集的滤膜组件，其特征在于：所述上下相邻的两层滤膜（100）之间的空隙内至少填充有两种不同粒径的微球（200）。

5.根据权利要求4所述的用于水环境DNA富集的滤膜组件，其特征在于：所述上下相邻的两层滤膜（100），位于上层滤膜（100）的滤孔孔径大于位于下层滤膜（100）的滤孔孔径；和/或所述黏胶剂为压力敏感型胶粘剂。

6.一种用于水环境DNA富集的收集器，其特征在于：所述收集器包括上座体（410）、中座体（420）以及下座体（430）；所述的上座体（410）与中座体（420）卡合连接形成上腔室，所述的中座体（420）与下座体（430）卡合连接形成下腔室，所述的上下腔室之间安装有权利要求1~5中任意一项所述的用于水环境DNA富集的滤膜组件。

7.一种利用权利要求1~5任意一项所述的滤膜组件进行水环境DNA富集和提取方法，具体步骤如下：

1）在负压条件下，进行水样的收集，收集的水样由滤膜组件（440）的上层进入，下层流出进行过滤，所述微球（200）支撑上、下相邻的两层滤膜（100），同时对流经的水体形成导流，过滤过程中所述水环境中的DNA富集至滤膜组件（440）上；

2）过滤完成后，将滤膜组件（440）取出，进行水环境DNA的提取：将滤膜组件（440）置于装有裂解液的无菌管中，进行振荡、破碎，过程中滤膜空隙中的微球（200）之间、微球（200）与滤膜（100）之间相互碰撞、摩擦，使生物DNA充分释放，进行DNA提取。