[发明专利]一种GSH响应型纳米钻石靶向药物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种GSH响应释药的纳米钻石靶向药物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)精密称取1.0mg真空干燥的羧基化纳米钻石(ND-COOH)，加入1-1.5mL的浓度0.1M、pH 5.8的MES缓冲溶液，并超声分散30min形成悬浊液，随后加入0.2mg EDC、0.25mg NHS，室温搅拌反应6h，反应完毕后以15000rpm高速离心8min弃除上清液，得到活化羧基的纳米钻石沉淀物；接着将活化羧基的纳米钻石沉淀物迅速分散到1-1.5mL的浓度0.1M、pH 8.4的硼酸缓冲溶液中，经过短暂超声分散形成悬浊液，快速加入0.3mg Boc-NH-PEG-NH₂，继续室温搅拌反应12h，待反应结束，以15000rpm高速离心8min移除上清液，并用去离子水高速离心洗涤3次，获得ND-PEG-NH-Boc沉淀物；将制备的ND-PEG-NH-Boc超声分散于1-1.5mL二氯甲烷中，滴入0.01mL三氟乙酸(TFA)，室温搅拌1h，反应结束后以15000rpm高速离心8min除去上清液，用二氯甲烷洗涤2-3次，真空干燥得到ND-PEG-NH₂，简写为 NP ；

(2)称取1.0mg上述制备好的ND-PEG-NH₂，加入1-1.5mL的浓度0.1M、pH 8.4的硼酸缓冲溶液并超声分散30min，随后移取0.05mg叶酸活性酯FA-NHS缓慢加入ND-PEG-NH₂反应液中，常温下避光快速搅拌24h；等到反应结束，以15000rpm高速离心8min移除上清液，并用去离子水洗涤2-3次，真空干燥得到ND-PEG-FA沉淀物，简写为 NPF ；

(3)称取1.0mg干燥的ND-PEG-FA沉淀物，加入1-1.5mL的浓度0.1M、pH 5.8的硼酸缓冲溶液并超声分散30min形成悬浊液；精密称取0.05mg 3,3'-二硫代二丙酸酐(DTDPA)溶解到0.8-1.0mL DMF中，随后逐滴加入到ND-PEG-FA悬浊液中，并用三乙胺(TEA)调节pH至8.4，避光室温搅拌反应12h；待反应结束，以15000rpm高速离心8min移除上清液，并用去离子水高速离心洗涤3次，真空干燥得到ND-PEG-FA/-SS-COOH，简写为 NPFSS ；

(4)称取1.0mg干燥的ND-PEG-FA/-SS-COOH，加入1-1.5mL的浓度0.1M、pH 5.8的MES缓冲溶液并超声分散30min，随后依次加入0.2mg EDC和0.25mg NHS，室温下搅拌反应6h；待反应完毕，以15000rpm高速离心8min移除上清液，并用去离子水高速离心洗涤3次，接着加入1-1.5mL浓度0.1M、pH 8.4的硼酸缓冲溶液超声分散30min，随后逐滴加入0.12mg浓度为1.0mg/mL的盐酸阿霉素的DMSO溶液，滴入0.001mL TEA，继续反应24h；待反应结束，以15000rpm高速离心8min，并依次用去离子水和无水乙醇洗涤至上清液无色，真空干燥得到ND-PEG-FA/-SS-DOX，简写为 NPFSSD 。

2.如权利要求1所述方法制备得到的GSH响应型靶向纳米钻石药物。

3.如权利要求2所述的GSH响应型靶向纳米钻石药物在制备抗肿瘤药物中的应用。