[发明专利]一种利用生物炭抑制水中胞外抗生素抗性基因转化的方法

权利要求书

1.一种利用生物炭抑制水中胞外抗生素抗性基因转化的方法，其特征在于，步骤如下：

在微生物的培养体系中加入生物炭浸出液，以抑制水中胞外抗生素抗性基因通过转化进入微生物细胞中；

所述生物炭浸出液为将生物炭在溶液体系中充分浸出，然后过滤去除生物炭颗粒后得到的溶液部分；所述生物炭为生物质原料水稻秸秆或花生壳经热解之后的炭化产物；所述的微生物为大肠杆菌，所述胞外抗生素抗性基因为携带有氨苄抗生素抗性基因的pUC18质粒。

2.如权利要求1所述的利用生物炭抑制水中胞外抗生素抗性基因转化的方法，其特征在于，所述生物炭的制备方法为：将洗净干燥的生物质进行粉碎，然后在陶瓷坩埚中将粉碎后的生物质压实，加盖后置于马弗炉中，升温至目标温度后维持在该温度进行热解，热解所得的炭化产物冷却后磨碎过筛，得到生物炭。

3.如权利要求2所述的利用生物炭抑制水中胞外抗生素抗性基因转化的方法，其特征在于，所述生物炭的热解温度为300℃~700℃，热解时间为5~7h。

4.如权利要求3所述的利用生物炭抑制水中胞外抗生素抗性基因转化的方法，其特征在于，所述生物炭的热解温度为300℃，热解时间为6h。

5. 如权利要求2所述的利用生物炭抑制水中胞外抗生素抗性基因转化的方法，其特征在于，所述生物炭浸出液的制备方法为：将所述生物炭与pH缓冲液混合，充分振荡后，将溶液过0.45 µm滤膜，得到生物炭浸出液。

6. 如权利要求5所述的利用生物炭抑制水中胞外抗生素抗性基因转化的方法，其特征在于，生物炭浸出液制备过程中，所述pH缓冲液为TB缓冲液，振荡温度为室温，振荡速率为150 r/min，振荡时间为3h。

7.如权利要求1所述的利用生物炭抑制水中胞外抗生素抗性基因转化的方法，其特征在于，所述的微生物的培养体系中加入生物炭时，生物炭加入后的每毫升培养体系含有2~8mg生物炭；所述的微生物的培养体系中加入生物炭浸出液时，生物炭浸出液加入后的每毫升培养体系中含有2~8mg生物炭当量的浸出物。