[发明专利]一种化妆品中rhEGF快速检测试纸卡、试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种化妆品中rhEGF快速检测试纸卡、试剂盒及其检测方法，可以实现对化妆品冻干粉剂水剂中EGF非法添加的快速检测。该rhEGF快速检测试纸卡可以通过观察对比T线和C线颜色快速判断样品中rhEGF含有与否。该检测方法准确可靠，耐用性强，不受检测温度的影响；操作简便，适用于化妆品中微量EGF的筛查，检出限为50ng/ml，上样量100ul，绝对检出限为5ng，相对于样品检出限为2ng/kg。其为保障化妆品安全性提供了有效的监督及检测方法。

技术领域

本发明化合物检测领域，具体涉及一种化妆品中rhEGF快速检测试纸卡、试剂盒及其检测方法。

背景技术

人表皮生长因子(Human Epidermal Growth Factor，hEGF)又称尿抑胃素，是一种由53个氨基酸组成的单链多肽，分子量为6200Da，等电点为pH4.7。hEGF是存在人体内的一种重要的多肽生长因子，最早在1974年由Cohen等和Gregory各自独立从人尿液中分离得到。

hEGF对多种组织来源的上皮及表皮细胞有较强的促有丝分裂活性，能刺激角膜上皮和内皮细胞增殖，促进角膜内皮细胞迁移，也能刺激皮肤表皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞等的增殖。临床应用研究表明，hEGF可以促进各种创伤的愈合，包括角膜损伤、皮肤创伤和胃肠溃疡等等。

目前，hEGF的提取难度较大、提取成本高且提取率较低，主要以利用重组DNA的方法和技术用于hEGF的生产和应用逐渐成为主流。现有技术中，hEGF多以采用重组酵母或大肠杆菌表达系统进行生产，提取的产物称为重组人表皮生长因子(Recommend HumanEpidermal Growth Factor,rhEGF)。rhEGF与天然hEGF在氨基酸组成和结构功能上基本没有差异，且产量大，工艺和质量可控，因此目前市面上的规模化的产品均为rhEGF。

由于rhEGF对表皮细胞增殖有促进作用，能够在化妆品中起着重要作用，用以促进正常表皮细胞的新陈代谢，以达到美白、抗皱、延缓衰老的作用。但rhEGF过度使用也具有明显的副作用，如表皮细胞无序增生和畸变，造成皮肤伤害甚至毁容等严重事件。基于此，有关法条明确了化妆品不允许添加hEGF(rhEGF)。

目前，化妆品市场上有众多具有修复痘印、改善皮肤光滑度的冻干粉剂、水剂等。部分化妆品冻干粉中可能非法添加了rhEGF。目前，检测hEGF(rhEGF)的方法有很多，如HPLC法、ELISA法，免疫斑点法、免疫印迹法、质谱法等，但是操作均相对繁琐，检测时间至少需要5小时以上，不能满足日常市场快速抽检的要求。因此，需要一种rhEGF快筛检测试剂盒法筛查肌肤修护化妆品冻干粉中hEGF(rhEGF)的方法，以达到简化操作步骤，提高灵敏度，缩短检测时间，便于快速筛查的使用需要。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种生长因子试纸卡；

本发明的另一目的在于提供一种rhEGF快速检测试剂盒；

本发明的另一目的在于提供使用上述试剂盒快速检测rhEGF的方法；

本发明的另一目的在于提供一种上述试剂盒在检测化妆品的rhEGF中的用途。

本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供：

一种生长因子快速检测试纸卡，包括试纸卡上壳、生长因子检测卡和试纸卡下壳；

上述生长因子快速检测试纸卡从上往下依次由硝酸纤维素膜、吸水纸和样品垫组成，统一粘贴在底板上，硝酸纤维素膜上标记有质控C线和检测T线；上述试纸卡上壳开有加样孔和观察孔，上述加样孔对应的生长因子检测卡位置上含有胶体金标记EGF单克隆抗体。

进一步地，上述质控C线为能与生长因子结合的羊抗鼠二抗。