[发明专利]非编码小RNA分子miRNA-4454在人源重组蛋白上的应用

说明书

本发明涉及一种非编码小RNA分子miRNA‑4454在人源重组蛋白上的应用，属于遗传资源技术领域。非编码小RNA分子miRNA‑4454在人源重组蛋白上的应用，miRNA‑4454在炎症综合症中表达增强，其与IL‑17能够互相作用；IL‑17为miRNA‑4454的靶基因。所述炎症综合症具体为过敏性哮喘。本发明建立过敏性哮喘小鼠模型，利用IL‑17RD缺陷小鼠miR‑4454 inhibitor及鼠源IL‑17RD重组蛋白处理，验证miR‑4454及IL‑17RD对IL‑17介导的过敏性哮喘的抑制效应。

技术领域

本发明涉及一种非编码小RNA分子miRNA-4454在人源重组蛋白上的应用，属于遗传资源技术领域。

背景技术

过敏性哮喘是严重危害人类健康的常见的呼吸系统慢性疾病，常发生由尘螨及花粉等过敏原引起的免疫系统炎症紊乱，导致特异性IgE增加、呼吸道高反应性及嗜酸性粒细胞浸润，进而引起呼吸道不可逆的重塑^[1-5]。呼吸道免疫系统炎症是过敏性哮喘病人发病、致死的主要原因。近年来发现，IL-17在过敏性哮喘炎症中起着重要的作用。过敏性哮喘中IL-17的增高不仅可引起呼吸道粘液增多和中性粒细胞浸润，而且通过一系列级联反应导致呼吸道重塑，参与了过敏性哮喘炎症的全过程，具体机理如图1所示。

正常情况下，黏膜富集IL-17分泌细胞，其功能以抵抗细胞外细菌和真菌感染的宿主防御为主。在过敏性哮喘中，IL-17异常增高，分泌大量的CXCL1、CXCL8、集落刺激因子等炎症因子及趋化因子，诱导大量的中性粒细胞等炎症细胞到呼吸道，从而引起并加重过敏性哮喘炎症。在过敏性哮喘的气道高反应及气道重塑中，IL-17炎症起着关键的作用，哮喘患者血清、痰液、肺泡灌洗液及肺组织中IL-17水平与过敏性哮喘患者及重症患者的炎症严重程度成正相关。但是，过敏性哮喘IL-17的致炎作用的十分复杂，迄今尚不清楚。研究显示，在尘螨或者花粉引起过敏时，当合并外界细菌或者病毒等病原菌感染时，诱导出的IL-17抗细菌反应，在细菌清除后没有及时受到抑制，就会引起更为严重的损害自身的免疫炎症反应。一般认为，是由于免疫抑制细胞-Treg细胞在哮喘时募集与下降，其维持免疫稳态的作用下降。但是，研究发现Treg的下降并不能解释这些所有的现象。

IL-17是一种促炎的细胞因子，由活化的CD4+T细胞亚群(常称为Th17)产生^[3,7]。IL-17家族由6种家族成员构成，分别为IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E和IL-17F，其中IL-17A最有活性，且IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D都是促炎细胞因子。IL-17A在炎症过程中，诱导产生促炎细胞因子和趋化因子，并能招募中性粒细胞和巨噬细胞由Th17、T细胞及某些免疫细胞产生，涉及免疫调节和炎症过程，等；IL-17D是由Th17和B细胞分泌的，其靶细胞是内皮细胞和骨髓前体细胞。IL-17受体家族是一群与自身免疫疾病免疫活性有关的受体，能介导IL-17信号通路，从而实现多种重要的生理功能。IL-17受体家族由5种成员组成，分别为IL-17RA、IL-17RB、IL-17RC、IL-17RD和IL-17RE。其中，IL-17RD是介导IL-17信号传导的细胞因子受体之一，可以与IL-17RA形成复合物，负调节IL-17A诱导的NF-κB活化和IL-6等促炎基因的表达。IL-17RD通过负调节Act1/TRAF6结合和破坏IL-17RA/Act1/TRAF6信号轴来协调这些调节作用^[14,16]。此外，IL-17RD还可促进IL-17A诱导的p38MAPK活化和MIP-2的诱导^[14]。在体内，IL-17RD缺陷小鼠中，IL-17A诱导的MIP-2表达的丧失与IL-17A诱导的肺和腹膜中性粒细胞浸润减少相关，而外源性MIP-2递送作用使这些中性粒细胞增多。从这些发现可以明显看出IL-17RD差异调控IL-17A诱导的NF-κB和MAPK信号通路，并且是促进IL-17A诱导的中性白细胞增多的重要介质。