[发明专利]一种凝结芽孢杆菌BC99及其筛选方法

说明书

本发明公开了一种凝结芽孢杆菌BC99及其筛选方法，凝结芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.19487，保藏时间为2020年03月18日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明提供凝结芽孢杆菌BC99来源于婴儿粪便，具有较强的抗逆性，对高温、人工胃液、人工胆盐和人工肠液具有较高的耐受性，并且能够保存较高的存活率，适合应用在食品加工和畜牧业中。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种凝结芽孢杆菌BC99及其筛选方法。

背景技术

乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)在动物肠道、口腔内含量丰富。乳酸菌可以利用碳水化合物产生有机酸、特殊酶系、乳酸菌素等。乳酸菌能促进动物生长，调节胃肠道正常菌群和维持微生态平衡，从而改善胃肠道功能、提高食物消化率和生物效价、控制内毒素、抑制肠道内腐败菌生长、提高机体免疫力等，在食品工业和畜牧产业中应用广泛。

目前广泛使用的益生菌主要是双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和屎肠球菌等，但上述益生菌菌株抗逆性较差，在加工过程中的损失较大。因此，高稳定性、高耐受性的菌株具有较大的开发潜能和市场。获得新型具有高耐受性和稳定性的芽孢杆菌具有重要意义。分离和筛选耐受性高的凝结芽孢杆菌，制成的微生态制剂可以更广泛地应用于畜牧业、水产养殖业、食品以及医药等行业中，具有较大的发展前景。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种凝结芽孢杆菌BC99及其筛选方法，具有耐高温、耐胃酸、耐肠碱的高耐受性，同时还具有较好的稳定性。

本发明采用的技术方案如下：

本发明提供一种凝结芽孢杆菌BC99，保藏编号为CGMCC No.19487，保藏时间为2020年03月18日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

本发明还提供一种凝结芽孢杆菌BC99的筛选方法，所述筛选方法包括如下步骤：

采样，无菌条件下采集健康婴儿粪便于无菌取样管中，加入已灭菌的生理盐水，充分震荡混合均匀，得到混合液；

梯度稀释，对混合液进行梯度稀释，得到稀释液；

培养，吸取稀释液至MRS琼脂平板涂布，菌液吸收完全后，于培养箱培养，得到待纯化菌落；

纯化，对待纯化的菌落进行反复划线分离培养，得到纯菌落的凝结芽孢杆菌BC99。

上述方案的进一步方案为，稀释液的梯度稀释浓度范围为10^-1-10^-6。

上述方案的进一步方案为，吸取稀释液的体积为100-200μL。

上述方案的进一步方案为，所述培养箱培养温度范围为30-37℃。

上述方案的进一步方案为，所述培养时间为24-48h。

与现有技术相比，本发明的技术方案具有如下优点和有益效果：

本发明提供凝结芽孢杆菌BC99具有较强的抗逆性，对高温、模拟胃液、胆盐和肠液具有较高的耐受性，并且能够保存较高的存活率，更加适合应用在食品加工和畜牧业中。

附图说明

图1为凝结芽孢杆菌BC99在牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落形态；

图2为革兰氏染色后的凝结芽孢杆菌BC99的显微镜观察图片。

具体实施方式