[发明专利]阿莫西林完全抗原及其制备方法和试剂条及其制备方法

说明书

本发明公开了一种阿莫西林完全抗原及其制备方法和试剂条及其制备方法。该阿莫西林完全抗原中，其阿莫西林分子的抗原决定簇能充分暴露，且具有较完整的空间构象，因此，本发明提供的阿莫西林完全抗原具有较好的免疫原性,可用于免疫分析。本发明的检测阿莫西林的胶体金免疫层析试剂条及其制备方法，该试剂条具有较高的阿莫西林检测灵敏度，且检测所需时间短，该检测试剂条使用简单、经济、便捷。

技术领域

本发明涉及生物医药材料领域，具体涉及一种阿莫西林完全抗原及其制备 方法，以及检测阿莫西林的试剂条及其制备方法。

背景技术

免疫分析是以抗原与抗体之间特异性识别和可逆性结合反应为基础的痕量 分析方法，其不仅适用于大分子化合物(如蛋白质、核酸、细菌)的检测，也 适用于小分子化合物(如激素、药物)的测定。建立小分子化合物的免疫分析 方法的关键是能够制备出对小分子化合物具有高亲和力和高选择性的抗体。由 于大多数小分子化合物的分子量小于1000，不具有免疫原性，即缺乏T细胞表 位而无法直接诱导动物机体等产生特异性抗体。然而，小分子化合物可以通过 适当的化学修饰方法，与大分子载体结合，生成小分子化合物-大分子载体的偶 联物，此偶联物即为完全抗原，它可以借助T细胞表位来间接诱导B细胞的增 殖及分化，产生特异性抗体。

阿莫西林(Melatonin,MLT)是一种小分子物质，化学名为N-乙酰-5-甲 氧基色胺，分子量仅为232.28D，不具有免疫原性，用于免疫，必须先与蛋白质 大分子载体结合，形成阿莫西林-蛋白质载体偶联的完全抗原后才具免疫原性。 然而，制备阿莫西林-蛋白质载体偶联的完全抗原不能影响阿莫西林的空间构 象，而且需要保持阿莫西林抗原决定簇(如5-甲氧基、N-烷基侧链)的有效性， 才能获得效价高、特异性强的阿莫西林抗体。因此，如何制备具有良好免疫原 性的完全抗原是建立测定阿莫西林的免疫分析方法的难点。

发明内容

本发明提供了一种阿莫西林完全抗原及其制备方法和试剂条及其制备方 法，旨在解决上述问题。

根据本申请实施例的第一方面，提供了一种阿莫西林完全抗原，其结构式为：

式中，R为载体蛋白，n为5_～20的自然数。

根据本申请实施例的第二方面，提供了一种阿莫西林完全抗原的制备方法， 包括以下步骤：

提供阿莫西林，其结构式为：

将阿莫西林溶解在N,N-二甲基甲酰胺溶液中，然后加入1-乙基-(3-二甲基 氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺，得到第一反应液，放入磁力 搅拌子，密封烧杯，外层采用锡箔纸包裹避光，在室温下搅拌反应10～16小时 后，得到第二反应液，其中，在所述第一反应液中，所述阿莫西林半抗原的浓 度为0.05mol/L，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟 基丁二酰亚胺的摩尔浓度分别为所述阿莫西林半抗原摩尔浓度的1～2倍；

配置载体蛋白的磷酸盐缓冲液；

将所述第二反应液逐滴加入到所述载体蛋白的磷酸盐缓冲液中，在0～4℃下 避光搅拌反应10～16小时后，得到含阿莫西林完全抗原的混合溶液，将所述含 阿莫西林完全抗原的混合溶液进行透析后离心，得到含阿莫西林完全抗原的上 清溶液，所述阿莫西林完全抗原的结构式为

式中，R为载体蛋白，n为5～20的自然数。

根据本申请实施例的第三方面，提供了一种检测阿莫西林的胶体金免疫层 析试剂条，包括背板、样品垫、金标垫、反应垫和吸水垫，其中所述样品垫、 金标垫、反应垫和吸水垫依次设置于所述背板上；所述反应垫上具有检测线和 质控线，检测线包被有阿莫西林完全抗原，所述质控线包被有羊抗鼠IgG的抗 体，所述金标垫上喷有阿莫西林抗体金标复合物。