[发明专利]一种羊蹄甲炮制品指纹图谱的建立方法

说明书

本发明公开了一种羊蹄甲炮制品指纹图谱的建立方法，包括供试品溶液的制备和使用HPLC获取指纹图谱的步骤。色谱条件包括：色谱柱为C18色谱柱；检测波长为200‑400nm；流速0‑2mL/min；流动相：流动相A为甲醇或乙腈，流动相B为水，流动相A和/或流动相B添加0.01%‑5%的三氟乙酸；流动相A的洗脱范围为0‑10%。该方法简单方便、重现性好、准确率高，提高了羊蹄甲炮制品鉴定的准确性，确保了中药品质。使用本发明的流动相体系和洗脱方法建立的指纹图谱，更好的呈现了羊蹄甲炮制品的特征峰，便于对样本进行区分和鉴定。该方法具有良好的精密度、重复性和稳定性，对羊蹄甲炮制品的鉴定起到重要的作用。

技术领域

本发明属于羊蹄甲炮制品分析技术领域，具体涉及一种羊蹄甲炮制品指纹图谱的建立方法。

背景技术

羊蹄甲来源于绵羊或是山羊的蹄甲，民间用来调剂免疫及催乳，但需炮制后使用。目前尚无羊蹄甲药用标准，也无相关鉴定研究，市场上也有将羊蹄甲炮制品与猪蹄甲炮制品混用的现象，从而影响羊蹄甲炮制品的品质。因此，为了鉴定掺假的羊蹄甲炮制品，有必要建立一种羊蹄甲炮制品的鉴定方法，有效保证羊蹄甲炮制品的药材品质，保证药材的临床疗效。

发明内容

为了解决以上现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种羊蹄甲炮制品指纹图谱的建立方法和羊蹄甲炮制品的鉴定方法。

为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

一种羊蹄甲炮制品指纹图谱的建立方法，该方法采用HPLC法对羊蹄甲炮制品进行鉴定，其中色谱条件包括：

色谱柱为C18色谱柱；

检测波长为200-400nm；

流速0-2mL/min；

流动相：流动相A为甲醇或乙腈，流动相B为水，流动相A和/或流动相B添加0.01%-5%的三氟乙酸（TFA）；

流动相A的洗脱范围为0-10%。

进一步的，流动相A的洗脱浓度：

0～20 min，流动相A为1%；

20～30 min，流动相A为1-2%；

30～45min，流动相A为2%；

45～50 min，流动相A为2-10%；

50～55min，流动相A为10-1%；

55～60min，流动相A为1%。

进一步的，所述方法还包括供试品溶液的制备方法：取净羊蹄甲，大小分开，用砂烫至鼓起呈金黄色时，取出，筛去砂子，放凉后粉碎；精密称取80目样品粉末1.0g，加15倍量水，称定质量，回流30min，冷却至室温，水补足减失的质量，收取滤液，用0.45μm微孔滤膜滤过，得供试品溶液。

进一步的，所述方法还包括吸取10μL供试品注入液相色谱仪进行测定，得到羊蹄甲炮制品水溶性成分指纹图谱。

一种羊蹄甲炮制品的鉴定方法，包括以下步骤：

（1）根据权利要求1-4任一项所述的方法测定待测样本的指纹图谱；

（2）将待测样本的指纹图谱与建立的标准指纹图谱进行对比，以特征峰计算，相似度不低于0.85为合格。

进一步的，保留时间为19.49min的成分峰为羊蹄甲炮制品的特征峰。