[发明专利]一组早期食管鳞状细胞癌筛查标志物及其在探针试剂盒中的应用在审
申请号: | 202010464184.2 | 申请日: | 2020-05-27 |
公开(公告)号: | CN111394470A | 公开(公告)日: | 2020-07-10 |
发明(设计)人: | 王立东;李欣然;赵学科;宋昕;雷玲玲;周福有;王伟;李恩民;李秀敏;高社干;秦艳茹;郭海周 | 申请(专利权)人: | 郑州大学第一附属医院;安阳市肿瘤医院;汕头大学医学院;新乡医学院;河南科技大学第一附属医院 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6851 |
代理公司: | 郑州翊博专利代理事务所(普通合伙) 41155 | 代理人: | 涂连梅 |
地址: | 450052 河南省郑州市二七区大学路40*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一组 早期 食管 细胞 癌筛查 标志 及其 探针 试剂盒 中的 应用 | ||
1.检测SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的试剂在制备早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述检测SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的试剂为检测SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的引物组合物和探针组合物。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述引物组合物由用于检测SLAMF1基因的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列、用于检测CRIM基因的SEQ ID NO.3和SEQID NO.4所示的核苷酸序列、用于检测CCSER1基因的SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列、用于检测MGARP基因的SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列、用于检测POMK基因的SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列组成;
所述探针组合物由SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQID NO.15所示的核苷酸序列组成。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述探针组合物中各个探针的核苷酸序列的5’端修饰有FAM荧光基因,3’端修饰有MGB非荧光淬灭基团。
5.检测SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的引物组合物和探针组合物在制备早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒中的应用。
6.一种用于检测早期食管鳞状细胞癌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中包含SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的检测试剂。
7.根据权利要求6所述的检测早期食管鳞状细胞癌的试剂盒,其特征在于,所述检测试剂为检测SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的引物组合物和探针组合物。
8.根据权利要求7所述的检测早期食管鳞状细胞癌的试剂盒,其特征在于,所述引物组合物由用于检测SLAMF1基因的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列、用于检测CRIM基因的SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列、用于检测CCSER1基因的SEQ IDNO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列、用于检测MGARP基因的SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列、用于检测POMK基因的SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列组成;
所述探针组合物由SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQID NO.15所示的核苷酸序列组成,所述探针组合物中各个探针的核苷酸序列的5’端修饰有FAM荧光基因,3’端修饰有MGB非荧光淬灭基团。
9.根据权利要求8所述的检测早期食管鳞状细胞癌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中含有SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因对应的标准cDNA。
10.根据权利要求9所说的检测早期食管鳞状细胞癌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的检测对象为食管组织;所述试剂盒的使用方法包括以下步骤:
(1)对食管组织样本进行RNA提取;
(2)对提取的组织样本RNA进行质量分析;
(3)利用提取的组织样本RNA逆转录合成样本cDNA;
(4)配制qRT-PCR反应体系;
(5)进行实时荧光定量PCR扩增反应,根据荧光PCR仪的扩增结果参照标准cDNA的扩增结果,对组织样本是否检测到SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因进行判断。
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