[发明专利]抗新型冠状病毒的抗体和使用该抗体的免疫检测

说明书

本发明公开了抗新型冠状病毒的抗体和使用该抗体的免疫检测。本发明还公开了所述抗体的功能性片段，其含有SEQ ID NO.1‑3的氨基酸序列的重链可变区，以及含有SEQ ID NO.5‑7的氨基酸序列的轻链可变区。所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。

技术领域

本发明属于细胞免疫学、分子生物学领域，涉及抗新型冠状病毒的抗体和使用该抗体的免疫检测。

背景技术

国际病毒分类委员会将新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2，世界卫生组织将感染此病毒引起的肺炎称为COVID-19。此病毒传染性强，传播途径广。该病毒能迅速适应人体环境，感染后在潜伏期即具有传播能力，同时还有一些无症状感染者报道，甚至在多种动物体内也检测到病毒核酸。这些因素使得对该病毒的防控变的非常复杂，而且目前没有有效治疗药物及疫苗上市。SARS-CoV-2属于冠状病毒属，为单股正链RNA病毒，大小约30kb，与SARS-CoV相似性为79％，与蝙蝠体内分离的冠状病毒(Coronavirus，CoV)相似性最高约88％。SARS-CoV-2具有典型的冠状病毒特征，病毒包膜上有典型的棘突，形似日冕。核衣壳为螺旋对称型，主要结构蛋白是核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein,NP)，NP全长420个氨基酸。NP在病毒结构蛋白中含量最多，在宿主感染早期大量表达，且免疫原性较强，能引起宿主强烈的免疫应答。因此，NP可作为SARS-CoV-2感染血清学诊断的主要靶标抗原。

由于特异性治疗药物及有效疫苗尚未研发成功，早期诊断成为防控疫情重要的措施，早期核酸诊断及临床诊断为确诊重要依据。虽然核酸诊断速度快，受采样的质量的影响大，存在假阳性和假阴性，影响防控措施的落实。部分无症状感染者在病程晚期核酸检测也呈阴性，单凭核酸检测很容易出现漏诊。血清学诊断是检测病原感染后机体的免疫反应，持续时间长，免疫反应稳定，且免疫反应随着病程进展呈动态变化趋势。因此，血清学诊断同样也是早期诊断和感染现状评价的的重要手段。

发明内容

本发明所要解决的问题

本发明的一个要解决的问题是提供一种特异性结合新型冠状病毒的单克隆抗体。

本发明的另一个要解决的问题是提供一种含有所述单克隆抗体的免疫诊断用的组合物。

解决技术问题的技术方案

为了简便且高灵敏度地测定新型冠状病毒并提高诊断的精度，本发明制作了多种抗新型冠状病毒的单克隆抗体用于根据利用免疫测定法测定，选择特别适于免疫测定法的单克隆抗体，确定重链可变区、轻链可变区的氨基酸序列和碱基序列，而且分析了6个CDR序列。通过使用本发明所开发的两种抗体，确认到能够以高灵敏度测定生物样品中的新型冠状病毒。

即，本发明如下所述：

本发明提供了一种特异性结合新型冠状病毒的单克隆抗体或其功能性片段，其含有：

(1)由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的重链CDRH1；

(2)由SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列组成的重链CDRH2；

(3)由SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列组成的重链CDRH3；

(4)由SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列组成的轻链CDRL1；

(5)由SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列组成的轻链CDRL2；

(6)由SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列组成的轻链CDRL3。

在本发明具体实施例中，所述单克隆抗体或其功能性片段含有由SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列组成的重链可变区，以及由SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列组成的轻链可变区。