[发明专利]NF-YB9突变型基因及其蛋白和应用有效

申请号：	202010459528.0	申请日：	2020-05-26
公开（公告）号：	CN111440805B	公开（公告）日：	2021-08-13
发明（设计）人：	牛百晓;张真雨;张娟;魏雪枫;陈忱	申请（专利权）人：	扬州大学
主分类号：	C12N15/29	分类号：	C12N15/29;C07K14/415;C12N15/84;A01H5/10;A01H6/46;C12Q1/6895;G01N33/68
代理公司：	南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204	代理人：	王艳
地址：	225009 ***	国省代码：	江苏;32
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摘要：
搜索关键词：	nf yb9 突变型基因及其蛋白应用
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【权利要求书】：

1.NF-YB9突变型基因，其特征在于，所述NF-YB9突变型基因在NF-YB9野生型基因的第14~17位核苷酸缺失；或第17~18位核苷酸缺失同时第20~45位核苷酸缺失；或第17~45位核苷酸缺失；或第14~17位核苷酸缺失以及第19位核苷酸缺失同时第43~49位核苷酸缺失，所述NF-YB9突变型基因其核苷酸序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3或SEQ IDNO：4所示。

2.权利要求1所述的NF-YB9突变型基因编码的突变型蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNO：5或SEQ ID NO：6或SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：8所示。

3.含有权利要求1所述的NF-YB9突变型基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体。

4.权利要求1所述的NF-YB9突变型基因、权利要求2所述的突变型蛋白，权利要求3所述的基因编辑载体在控制水稻粒型中的应用。

5.一种基因改良的转基因水稻的获得方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）使水稻包含权利要求1所述的NF-YB9突变型基因；或

2）使水稻表达权利要求2所述的突变型蛋白。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，其包括转基因、杂交、回交或无性繁殖步骤。

7.鉴定权利要求6所述的基因改良的转基因水稻的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）鉴定所述水稻是否包含权利要求1所述的NF-YB9突变型基因；或，

2）鉴定所述水稻是否表达权利要求2所述的突变型蛋白；

所述鉴定方法通过设计引物将CRISPR/Cas9编辑位点区域扩增出来，所述引物序列为：NF-YB9-sF：GTAGTGAAGGAAGTGCAATAAA；

NF-YB9-sR：CCATGGCCCAGACGAGGT。