[发明专利]一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法

说明书

本发明公开了一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，具体包括以下步骤：S1、称取1.00g一枝蒿，置于锥形瓶中，然后在锥形瓶中加入纤维素酶量，然后再加入10‑50mL且体积分数为30‑70％的乙醇溶液，调节pH为5，在水浴温度为30‑70℃的温度条件下，提取1.5h，反应结束后，放入微波超声萃取仪中，设置微波功率600W，微波时间为1‑5min；S2、根据S1中，待反应结束后，将溶液旋转蒸发至乙醇完全蒸出，本发明涉及黄酮萃取技术领域。该微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，可实现采用微波辅助酶解法提取新疆一枝蒿总黄酮，同时在不同的变量中探究出最佳的试验方法及试验最佳条件，以提高新疆一枝蒿总黄酮的提取率，使得有效资源能够有效利用到最大化。

技术领域

本发明涉及黄酮萃取技术领域，具体为一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法。

背景技术

新疆一枝蒿是新疆特有的一种菊科多年生草本植物，为菊科蒿属苦艾组植物，主要分布在新疆北疆一带，新疆一枝蒿是维药中常用药物之一，以全草入药，新疆一枝蒿性寒，味辛苦，具有清热解毒、健胃消食、镇静止吐、抗过敏等功效，用于治疗毒蛇咬伤、荨麻疹、消化不良、感冒、过敏性疾病等，具有很高的开发利用价值，新疆一枝蒿作为疗效确切的地道药材，已广泛应用于临床，有研究报道新疆一枝蒿中含有黄酮类、倍半萜类、苷类、多糖类、挥发油类、新疆一枝蒿酮酸等化学成分，其中黄酮类化合物在新疆一枝蒿中含量丰富，是其主要活性成分，具有抗氧化、抗病毒、抑菌等作用，从新疆一枝蒿中已分离鉴定25个黄酮类成分，主要包括黄酮及黄酮苷、黄酮醇类、2-苯氧色原酮类等。

新疆一枝嵩全草中含有如下化学成分：黄酮类、倍半萜类、多糖类及其氨基酸类、挥发油类和生物碱类等，目前对于新疆一枝蒿总黄酮的提取方法主要为传统的回流提取法和超声波法，超声波提取效率较高，但存在功率过高或提取时间过长导致黄酮类成分被破坏的情况，而且过程中消耗大量的有机溶剂，对环境不友好，因此本发明针对以上问题，提供了一种微波辅助酶解法制备新疆一枝蒿总黄酮的方法。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，解决了超声波提取效率较高，但存在功率过高或提取时间过长导致黄酮类成分被破坏的情况，而且过程中消耗大量的有机溶剂，对环境不友好的问题。

(二)技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种微波辅助酶解制备一枝蒿总黄酮的方法，具体包括以下步骤：

S1、称取1.00g一枝蒿，置于锥形瓶中，然后在锥形瓶中加入纤维素酶量，然后再加入10-50mL且体积分数为30-70％的乙醇溶液，调节pH为5，在水浴温度为30-70℃的温度条件下，提取1.5h，反应结束后，放入微波超声萃取仪中，设置微波功率600W，微波时间为1-5min；

S2、根据S1中，待反应结束后，将溶液旋转蒸发至乙醇完全蒸出，用石油醚萃取三次之后将总黄酮的粗提取液全部转移至50mL容量瓶中，加入体积分数为95％的乙醇溶液定容，摇匀后作为待测样品溶液；

S3、然后精密量取1mL待测液置于10mL比色皿中，用蒸馏水补充至3mL，各比色皿中加入5％的NaNO2溶液0.5mL，摇匀放置6min，再加10％的Al(NO3)3溶液0.5mL，摇匀放置6min，加4％的NaOH溶液5.0mL，加水至刻度，摇匀放置15min；

S4、最后使用紫外分光光度法，可见分光光度计在510.5nm测吸光度，然后对照标准曲线求得总黄酮浓度，最后按照下列公式计算总黄酮提取量(mg/g)，计算公式：

优选的，所述S1中的纤维素酶量为7％，纤维素酶能够破坏植物中的细胞壁，可以使细胞内活性成分的溶出量增加，因此加入的酶量对总黄酮的提取效果有重要影响。