[发明专利]一种鲨鱼硫酸软骨素的提取方法

说明书

本发明公开了一种鲨鱼硫酸软骨素的提取方法，属于海洋生物技术领域。本申请以鲨鱼软骨粉为原料，集成生物酶解技术、混菌微生物发酵技术、现代生物分离技术，研制开发出高抗氧化能力的鲨鱼硫酸软骨素，其中生物酶解技术采用的复合酶系为木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶和风味蛋白酶中的一种或几种的混合物，混菌微生物发酵的发酵菌种主要包括米曲霉、冷加糖芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。利用本发明工艺制备硫酸软骨素产品得率高，具有较高的抗氧化能力和显著的抗肿瘤功效，可广泛应用于预防肿瘤等医疗保健食品中。

技术领域

本发明涉及一种鲨鱼硫酸软骨素的提取方法，尤其是一种利用生物酶解和微生物协同制备高提取率和免疫增强能力的鲨鱼硫酸软骨素新产品，属于海洋生物技术领域。

背景技术

鲨鱼是世界上最古老、最长寿的深海海洋生物之一，在地球上已生存了四亿年之久，它具有完善免疫系统，生命力极强，几乎不被疾病感染，即使受到外伤，伤口也能很快复原，鲨鱼患癌症的几率约为1/百万。我国鲨鱼药用始见于《本草经集注》，其软骨主要由软骨细胞和含有胶原纤维及大量蛋白多糖和细胞外基质构成，从鲨鱼软骨中提取的多糖在临床上主要用于治疗神经痛、偏头痛、腹腔手术后疼痛等。在欧、美、日等发达国家，鲨鱼软骨多糖作为保健食品或保健药品长期应用于防治冠心病、心绞痛、心肌梗死等疾病，无明显的毒副作用。近年来研究表明鲨鱼软骨中除富含钙、磷、镁等矿物质外，还含有多种粘多糖及硫酸软骨素，具有显著的抗凝血、降血脂、抗病毒和抗肿瘤等功用，是不可多得的天然食品资源。由于鲨鱼软骨粉具备促进人体软骨再生，抑制新生血管的天然功效，因此鲨鱼软骨粉是一种优良的补钙原料。近年来，鲨鱼翅骨粉保健食品开发得到快速发展，但仍存在保健产品原料单一、功能活性成分无法充分利用、产品食用不便等缺陷，制约鲨鱼翅骨粉保健食品产业可持续发展。

硫酸软骨素是广泛存在于动物结缔组织中的糖胺聚糖，具有缓解关节炎、降血脂、抗氧化、抗血管生成等多种生理功能，广泛应用于食品、医药、化妆品等领域，具有广阔的开发前景。有研究表明鲨鱼软骨富含硫酸软骨素，虽然有厂家开始生产鲨鱼硫酸软骨素，但目前尚存在提取工艺复杂、费时、成本高、产品质量不稳定、得率低等问题。

采用传统的稀碱、稀碱盐、稀碱酶等提取硫酸软骨素的方法，产品得率低，蛋白质和氮杂质含量较高。专利技术201811632893.6公开了一种鲨鱼硫酸软骨素的提取方法，采用复合二步酶解工艺制备鲨鱼硫酸软骨素，可替代现有的固定化酶酶解工艺，其产品收率达25-30％，纯度达90-92％，但目前鲨鱼硫酸软骨素提取方法中多采用稀酸或稀碱进行预处理，给鲨鱼硫酸软骨素的提取带来极大的环保压力，目前尚未发现直接利用酶解和微生物发提取鲨鱼硫酸软骨素的报道。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，实现鲨鱼软骨粉等海洋生物资源的功能活性物质高效提取及免疫增强能力显著提升，本申请提供一种鲨鱼硫酸软骨素的提取方法，集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌微生物发酵技术、海洋生物资源营养调配技术，研制开发出高免疫增强能力的鲨鱼硫酸软骨素，满足保健、医疗、食品等领域对鲨鱼硫酸软骨素的应用需求，该工艺制备硫酸软骨素产品得率高，产品具有较高的抗氧化能力和显著的抗肿瘤功效，可广泛应用于预防肿瘤医疗保健食品中。

本发明通过下述技术方案实现上述技术效果：

一种鲨鱼硫酸软骨素的提取方法，具体包括如下步骤：

（1）预处理：将鲨鱼软骨粉粉碎过100目筛，加如纯净水溶解；

（2）复合酶解：向步骤（1）中的滤液中加入鲨鱼软骨粉质量比1～2%的复合酶制剂，在40～60℃的条件下酶解4～6h；

（3）发酵液制备：向酶解液中加入酶解液质量比2%葡萄糖、0.15～0.20%(NH₄)₂SO₄、0.10～0.15% KH₂PO₄、0.1%MgSO₄，制备液体发酵培养基；